白细胞过滤分离-白细胞过滤器过滤原理
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1、免疫细胞分类及分离方法
免疫细胞T 细胞及B 细胞的分离 将淋巴细胞悬液通过尼龙棉柱,B 细胞粘附于尼龙棉上,T细胞则不粘附,先用RPMI l640 培基洗脱尼龙棉柱,流下的细胞悬液含有丰富的T 细胞。
包括粒细胞、单核巨噬细胞、NK细胞、γδT细胞,以及T细胞和B细胞。粒细胞、单核巨噬细胞、NK细胞、γδT细胞是参与机体非特异性免疫作用的主要细胞。
B-1细胞主要识别胸腺非依赖性抗原(TI抗原),即非蛋白质类抗原如脂类、多糖抗原等,这些抗原可直接激活B细胞,无需Th细胞的辅助。B-2细胞介导对胸腺依赖性抗原(TD抗原)即蛋白质抗原的免疫应且须有Th细胞的辅助。
收集的脱落细胞经洗涤后悬浮在RPMI l640 培基中备用。CD4 细胞亦可用此法分离。 用微生态制剂提高免疫力的研究和使用由来已久。
方法 无菌抽取静脉血2ml,去掉针头注人含有肝素的无菌试管中摇匀,加入2ml Hanks溶液进行对倍稀释,混匀。
2、简述目前临床采用的各种成分血的特点和适应证。
从血型变化的历史来看,最早出现的是O型血,当时以食肉为主,所以O型血的人对于肉类的吸收能力会比较好,更适合吃肉。紧接着的是A型血,A型血以农耕民族的人为主,肠胃更习惯的食物是谷物和蔬菜。
临床化学检验血液标本分为血清、血浆和全血3种。
全血中除红细胞外,其余成分浓度低,有的在储存过程中已来丧失功能或活性,起不到治疗作用。全血中主要有效成分源是红百细胞,其疗效与红细胞制品相似,而全血中保留的各种其他成分度不良反应却比红细胞多。
主要成分是血浆、血细胞和遗传物质。它是一种特殊的结缔组织,即生命系统中的组织层次。血液中含有各种营养物质,如无机盐、氧气、细胞代谢产物、激素、酶和抗体。它具有营养组织、调节活性和防御有害物质的功能。
成分输血的优点如下所述:(1)疗效显著,副作用小,具有高纯度、高效价、体积小的特点,输血后副作用小,效果显著。(2)开发及合理使用血液资源,血液中的各种成分可广泛用于临床,做到一血多用、节约用血。
3、血小板分离纯化技术的常用方法介绍
流式细胞术流式细胞分选技术是目前最先进的分离纯化技术之一。
早期的血小板分离技术主要是根据血小板的物理属性如密度等进行分离的,用2010年的标准看,其分离的灵敏度及分辨率都不高,以离心为主要手段的分离方法仅能除去70%-95%的白细胞,且血小板损失量较大,一般血小板回收率为70%。
PBMC分离方法是一种生物技术,它可以将多种血液成分(如红细胞、血小板和淋巴细胞)分离出来,从而获得血液中纯的单克隆T细胞。
第一种方法:AB型献血者在血站献血200ml或400ml后,每袋血由血站进行血细胞离心后分离,采出血小板,这叫手工分血小板。
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