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用什么方法分离细胞中的酶,分离胞内酶时可以采用什么方法将细胞进行破壁处理?

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  1. 微生物中提取和分离果胶酶的基本步骤?

1、微生物中提取和分离果胶酶的基本步骤?

回答如下:微生物中提取和分离果胶酶的基本步骤如下:

1. 选择富含果胶酶的微生物菌株:通过筛选和培养,选择富含果胶酶的微生物菌株,如细菌、真菌或酵母等。

2. 培养微生物:将选定的微生物菌株接种到适宜的培养基中,并进行适当的培养条件(如温度、pH值、培养时间等),以提高果胶酶的产量。

3. 收获和分离微生物发酵产物:在培养结束后,采集发酵液或细胞悬浮液等,通过离心或过滤等方法将微生物细胞和培养基分离。

4. 预处理:对收获的发酵产物进行预处理,如加热、酸碱调节等,以去除杂质和不需要的成分。

5. 提取果胶酶:利用适当的提取方法,如超声波提取、冷冻破碎、酶解等,将果胶酶从预处理的发酵产物中提取出来。

6. 纯化果胶酶:通过分离和纯化技术,如离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等,将提取得到的果胶酶纯化,去除其他蛋白质和杂质。

7. 活性测定:对纯化后的果胶酶进行活性测定,确定其酶活性和纯度。

8. 保存和应用:将纯化的果胶酶进行冷冻保存或冻干,以便后续的研究和应用。

需要注意的是,具体的步骤和方法可能因实验目的、微生物菌株的特性和实验条件等而有所不同。

源于微生物的酶,如果是细胞外酶,粗酶液制备比较简单,即通过过滤或离心去除菌体即可。如果是细胞内酶,则需要利用超声波法、酶解法、碱、去垢剂法以及研磨法等破碎细胞,使酶释放出来。

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