大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于分离原代心肌细胞的问题，于是小编就整理了3个相关介绍分离原代心肌细胞的解答，让我们一起看看吧。

1. 原代细胞的分离培养
2. 原代细胞分离出现组织粘稠,细胞消化不下来
3. 原代细胞分离提取方法及注意事项

1、原代细胞的分离培养

原代培养即直接从有机体取下细胞、组织或器官，让它们在体外维持与生长。

漂洗 将含有钙、镁离子的培养基沿瓶壁缓缓加入，中止消化反应，采用漂洗法洗 2-3 次后，加入完全培养基。

静置培养：原代细胞在消化分离后，置于CO2培养箱的头24～48h （必要时72h）内，应处于绝对静置状态，切忌不时地取出培养瓶观察生长状况，这将使原代分离细胞难以贴壁，更谈不上伸展和增殖，初学者尤应注意。

原代细胞的提取方法包括：一般悬浮细胞，如血液细胞，就分离后，直接培养。培养组织中的细胞，就需要消化过后，进行培养，也有用组织块培养的。

常用的适合做原代培养的材料包括： 鼠、人类的胚胎、脐带、脂肪、血液、骨髓、器官、组织和细胞等。原代培养是指从组织或细胞中直接分离出的细胞在适当的培养基中进行培养。

2、原代细胞分离出现组织粘稠,细胞消化不下来

具体原因有以下几种：细胞黏附力强：BM-MSCs具有较强的黏附力，容易附着在培养皿表面，这会导致消化困难。为了解决这个问题，可以在实验过程中使用胰蛋白酶处理前，将细胞进行充分摇匀，以减少细胞间的黏附。

因此用于药物实验，尤其是药物对细胞活动、结构、代谢、有无毒性或杀伤作用等，是极好的工具。常用的原代培养法有组织块培养法和消化培养法。

您要问的是加药的贴壁细胞消化不下来怎么办吗？先用消化液冲洗贴壁细胞，中和血清，倒掉。然后再加一定量的消化液。37度消化。2到3分钟，即可。PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37度消化。

该物质细胞消化加完胰酶变成粘稠状是的。提取培养细胞的基因组DNA，细胞量很大大约是5*107，在用胰酶消化细胞后出现了粘稠的细胞团，肉眼看上去就像鼻涕，在镜下观察是类似霉菌的一大团细胞，用吸管吹打不开。

3、原代细胞分离提取方法及注意事项

点。一要用酶制剂（最常用的是胰蛋白酶）处理组织块，除去细胞间质，使细胞相互分离，形成细胞悬液；二细胞生长方式多为单层（ monolayer ）。

原代细胞的提取方法包括：一般悬浮细胞，如血液细胞，就分离后，直接培养。培养组织中的细胞，就需要消化过后，进行培养，也有用组织块培养的。

两部灌流法的灌流液，ph值，氧气等因素，以及灌流时间很重要 如果血细胞去的非常干净，可以不用percoll分离 3，用低速离心（50g 2 min），死细胞在上层。 台盼蓝检测后基本95%以上活性。

注意事项 （1）无菌操作：细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因，必须加强各个环节的无菌操作观念，以预防为主，一旦污染，一般很难消除。（2）培养液：所用的培养液必须满足细胞生存和生长的必要条件。

原代细胞产品专家齐氏生物提醒，原代细胞培养注意事项，供参考：实验材料要新鲜，从活体分离材料后要低温保存，并尽快进行细胞分离实验。无菌操作。操作时用的培养液，可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。

到此，以上就是小编对于分离原代心肌细胞的问题就介绍到这了，希望介绍关于分离原代心肌细胞的3点解答对大家有用。