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1. 淋巴细胞分离去除单核细胞方法不包括
2. 外周血单个核细胞分离为什么先加淋巴细胞分离液后加血液
3. 如何除去密度梯度离心法分离获得的PBMC其中含有的大量单核细胞?
4. 淋巴细胞分离液的分离原理是什么?
5. 求人外周血B、T淋巴细胞的分离方法

1、淋巴细胞分离去除单核细胞方法不包括

【答案】：D Percoll分离液法也称连续密度梯度离心法、贴壁黏附法、吸附柱过滤法和磁铁吸引法可用于淋巴细胞分离去除单核细胞；Ficoll分离液法主要用于分离外周血中的单个核细胞。

淋巴细胞分离的主要方法有黏附贴壁法、吸附柱过滤法、磁铁吸引法、Percoll分离液法。

淋巴细胞不包括单核细胞。淋巴细胞是白细胞的一种，是体积最小的白细胞，由淋巴器官产生，是机体免疫应答功能的重要细胞成分。

【答案】：B 单个核细胞的比重与红细胞、白细胞及血小板不同，可通过密度梯度离心进行分离。T细胞表面有CD3分子，用CD3抗体包被免疫磁珠，T细胞与之结合，B细胞不能结合。细胞经孵育再通过磁场便能分离。

从PBMC中分离淋巴细胞的方法有：（1）贴壁粘附法；（2）吸附柱过滤法；（3）磁铁吸引法；（4）Percoll分离液法。

2、外周血单个核细胞分离为什么先加淋巴细胞分离液后加血液

体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞，目前主要的分离方法是ficoll-hypaque（葡聚糖－泛影葡胺）密度梯度离心法，因为血液中各有形成分的比重存在差异最多12天，但需要刺激。

血液中各种细胞的比重不同，淋巴细胞与单核细胞的比重约为070，而粒细胞和红细胞的比重为092左右。将血液加至分离液上，通过离心，可使一定比重的细胞按相应密度梯度进行分布，从而将淋巴细胞与其它血细胞分离开。

抽血后，加到淋巴细胞分层液中，经过离心，就可以分离出单个核细胞。包括淋巴细胞和单核细胞。希望对您有帮助。

因此，将血液轻轻加在比重为 076～078 的分离液上，使成一界面，再经离心，即出现分层，最上面为血浆层，界面处有一白色云雾状细胞层即为淋巴细胞和单核细胞，而红细胞和粒细胞则沉于管底。

红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重，离心后漂浮于分层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可从外周血中分离到单个核细胞。

3、如何除去密度梯度离心法分离获得的PBMC其中含有的大量单核细胞?

体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞，目前主要的分离方法是ficoll-hypaque（葡聚糖－泛影葡胺）密度梯度离心法，因为血液中各有形成分的比重存在差异最多12天，但需要刺激。

方法：在短中管中加入适量淋巴细胞分离液。取肝素抗凝静脉血与等量Hank；s液或RPMI1640充分混匀，用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，注意保持清楚的界面。水平离心2000rpm×20分钟。

体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞，目前主要的分离方法是Ficoll-hypaque（葡聚糖－泛影葡胺）密度梯度离心法，因为血液中各有形成分的比重存在差异，因此得以分离。

PBMC分离方法的原理是基于血液成分不同的密度，通过在双重密度梯度中离心，利用较低密度部分的小分子浮力将红细胞沉淀，从而获得纯化的单克隆T细胞。

【答案】：D Percoll分离液法也称连续密度梯度离心法、贴壁黏附法、吸附柱过滤法和磁铁吸引法可用于淋巴细胞分离去除单核细胞；Ficoll分离液法主要用于分离外周血中的单个核细胞。

4、淋巴细胞分离液的分离原理是什么?

将血液加至分离液上，通过离心，可使一定比重的细胞按相应密度梯度进行分布，从而将淋巴细胞与其它血细胞分离开。材料 淋巴细胞分离液 （比重077土0.001）。 肝素。 无Ca2 、Mg2 的Hanks溶液，pH2～6。

密度梯度离心法分离淋巴细胞的原理是：常用来分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层液比重是077±0.001的聚蔗糖（Ficoll）-泛影葡胺（Urografin）（F／H）分层液。

PBMC分离方法的原理是基于血液成分不同的密度，通过在双重密度梯度中离心，利用较低密度部分的小分子浮力将红细胞沉淀，从而获得纯化的单克隆T细胞。

其兼有免疫配基的性质和磁响应性质，即在磁场中显示磁性，移出磁场时磁性消除。

你好 取比重077的Percoll分离液X ml与离心管中，将等倍稀释的抗凝血1/2 X ml 小心叠加在分离液上，经水平离心（1500rpm）后，便得四个细胞层，从而分离出淋巴细胞。

5、求人外周血B、T淋巴细胞的分离方法

先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物，然后用CD4 T细胞的单抗，免疫磁珠法分离；或者利用流式细胞仪进行分选。

PBMC分离方法是一种生物技术，它可以将多种血液成分（如红细胞、血小板和淋巴细胞）分离出来，从而获得血液中纯的单克隆T细胞。

取新鲜抗凝血1ml，与生理盐水1：1 混匀后，小心加于2ml细胞分离液之液面上；以400g（约1500转/分，半径15cm水平转子）离心20分钟，此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层：为血浆层。

外周血中除红细胞外，还有粒细胞、单核细胞和淋巴细胞及血小板等，通常是分离这些血细胞的重要来源。其分离方法有四种：自然沉降法、差异沉降法、氯化铵分 离法、Ficoll分离法。

差速离心法是无法分离B细胞的。可以采用抗体标记来分离。根据抗体所标记的物质不同，一般有两种方法：标记了磁珠，颗粒通过吸附。标记了荧光素，则可以通过流式分选。

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