大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于分离心脏成纤维细胞胶原酶的问题，于是小编就整理了3个相关介绍分离心脏成纤维细胞胶原酶的解答，让我们一起看看吧。

1. Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶有什么区别?
2. 小鼠心脏成纤维细胞胶原酶浓度
3. 如何应用差异贴壁法在肿瘤细胞建系早期尽快去除成纤维细胞

1、Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶有什么区别?

胶原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细 胞，用于哺乳动细胞的分离。胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分，分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。

存在位置不同 胶原蛋白1型：主要存在于成人皮肤、 肌腱、骨组织。胶原蛋白2型：主要存在于婴儿皮肤或血管内膜、肠道。胶原蛋白3型：主要存在软骨、玻璃体、椎间盘等。

胶原酶仅对细胞间质有消化作用而对上皮细胞影响不大。因此适于消化分离纤维性组织、上皮及癌组织，可使上皮细胞与胶原成分分离而不受损害。常用剂量为最终浓度200U/ml（约为1mg/mL）或0.03%~0.3%。

在医学上的应用最为广泛。Ⅰ型胶原在鱼类胶原中一个最显著的的特点是热稳定性比较低，并呈现有鱼种的特异性。

可以。二型胶原酶（TypeIIcollagenase）是一种酶类物质，主要用于胶原蛋白的降解和分离，重复利用可以使酶更容易保持活性，并具有较长的使用寿命，适宜的重复利用有助于延长酶的寿命。

2、小鼠心脏成纤维细胞胶原酶浓度

培养液：1：1 混合的DMEM / F12 培养液，添加终浓度为10%小牛血清（FCS）、100IU/ml 青霉素、100μg/ml 链霉素。

准备工作：准备酶，一般80ml，（0.1%的胰酶与0.03%胶原酶2，用HBSS配。准备3个中皿（10cm），每皿到入HBSS备用。

心肌成纤维细胞和心肌细胞细胞总数占整个心脏细胞数的90%左右，而心肌成纤维细胞就占了60%-70%。

以PBS 彻底漂洗数次，胰蛋白酶消化，以每分钟1000 转的速率离心5min，收集沉淀，用新培养液悬浮，调整浓度为3×105g 个/ml。 将细胞接种于经明胶预处理的培养皿中。（明胶预处理： 0.1%明胶溶液浸泡2h， 移走多余的明胶，待自然干燥。

3、如何应用差异贴壁法在肿瘤细胞建系早期尽快去除成纤维细胞

如何应用差异贴壁法在肿瘤细胞建系早期尽快去除成纤维细胞 就是用胶原酶处理消化组织达到分离细胞的目的，所用胶原酶有不同类型：胶原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和肾上腺组织细胞的分离。

可以根据两种细胞的培养方法和贴壁速度，一般成纤维细胞贴壁快，肿瘤细胞慢一些，除去成纤维细胞的方法很多，比如反复贴壁法，机械刮除法等。你可以找些这方面的资料，网上很多的。

最快的办法，用齐氏生物的FibrOutTM成纤维抑制剂，效果还是不错的！成纤维细胞生长抑制试剂盒—FibrOut 是由多种生化复合物组成的混合物、抗体或特殊的试剂。

消化法：必须用胶原酶消化； 组织块法：用锐利刀剪，组织块不必剪得很小，米粒大小即可，放置在6孔板内，一孔内5-6个组织块，加入少量液体，以组织块不漂起为宜，第三天换等量液体。

离心、培养。优点：速度快；雪旺细胞产量高；不用抗有丝分裂药物抗血清和补体。由于该方法是在分离获得细胞的同时，就去除了成纤维细胞，因此其速度明显快于其它方法，缺点是成纤维细胞含量较高于其他方法。

到此，以上就是小编对于分离心脏成纤维细胞胶原酶的问题就介绍到这了，希望介绍关于分离心脏成纤维细胞胶原酶的3点解答对大家有用。