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1. 利用培养基限定法纯化动物细胞的方法利用培养基限定法纯化动物细胞的方...
2. 如何从组织中分离出单个活细胞
3. 分离各种细胞器的方法有哪些
4. 目前动物细胞培养液的去除细胞固液分离常采用哪种方法

1、利用培养基限定法纯化动物细胞的方法利用培养基限定法纯化动物细胞的方...

培养规模。由于各种固定化系统可以获得相同的细胞密度，且细胞的产率主要取决于细胞的扩散，因此反应器的体积是培养规模放大的主要决定因素。虽然微载体系统可以提供最大的单元操作，但其他系统也可以通过增加单元套数而获得放大。

、平板划线法是通过连续划线，将菌种逐步稀释分散到培养基表面，稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，分别涂布到培养基表面。当它们稀释到一定程度后，微生物将分散成单个细胞，从而在培养基上形成单个菌落。

悬浮培养方法：在悬浮培养前，对动物细胞的生长和生理特性进行充分的考察，是十分必要的，能为悬浮培养提供有益的参考。悬浮培养可以从两个方面入手，一是改变动物细胞的培养环境，实行阶段培养；二是进行代谢调控。

复苏 把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。

2、如何从组织中分离出单个活细胞

动物组织中细胞间可通过纤维蛋白维持细胞的位置，故可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。分离植物组织中的细胞可用解离液（质量分数为15%的盐酸：体积分数为95%的酒精=1：1），解离液可以破坏植物组织的细胞间的联系。

细胞分离就是通过物理、生物、化学的方法，将生物组织分离为单细胞分散系的过程。一般动物组织经培养，其细胞会延培养基表面平铺生长，自行达到细胞分离的目的。还可用胶原酶处理分离。

细胞在一定浓度的外界有色溶液（红墨水）中，溶液变色，为死细胞（活细胞质壁分离流出的只有水，而没有细胞其他化合物），而死细胞不经解离就能被染色。

所以，首先可以通过形态观察，看它是否维持完整的细胞形态，死细胞由于生理条件的改变会出现裂解或自融的现象。一些染色剂可以使活细胞和死细胞染色不同从而区分他们。其次，可以测试细胞内含物在一定时间内是否处于稳态。

首先细胞产物没有完整的细胞结构，而且一般也看不到，能够看清楚形状的基本就是细胞了，不太可能是细胞产物，若要检测细胞产物，往往要特殊染色。

3、分离各种细胞器的方法有哪些

一）、差速离心（differential centrifugation）在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心，用于分离不同大小的细胞和细胞器。

分离各种细胞器常用的方法是差速离心法。在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心，用于分离不同大小的细胞和细胞器。

分离细胞器的方法有多种，其中最常用的是差速离心法。这种方法是通过逐渐增加离心机的转速和时间，使细胞器在不同转速下分离出来。将细胞样品放入离心管中，然后在低速离心机中离心一段时间，使细胞沉淀下来。

差速离心法是交替使用低速和高速离心，用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法，此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离。

4、目前动物细胞培养液的去除细胞固液分离常采用哪种方法

通常可以采用单克隆稀释法或限制性稀释法来分离单个细胞。对于单克隆稀释法，可以通过限制性稀释来分离单个细胞，并在培养基中进行单个细胞的培养和筛选。

常用的破碎组织细胞的方法有：机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用，使细胞破碎。常用设备有，高速组织捣碎机、匀浆器、研钵等。渗透破碎法这种方法是在低渗条件使细胞溶胀而破碎。

动物接种 这是最原始的病毒培养方法。常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等，接种的途径有鼻内、皮下、皮内、脑内、腹腔内、静脉等。根据病毒种类不同，选择敏感动物及适宜接种部位。鸡胚接种鸡胚对多种病毒敏感。

无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。

分离各种细胞器的方法分离各种细胞器常用的方法是差速离心法。在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心，用于分离不同大小的细胞和细胞器。

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