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1. 人的中性粒细胞分离液可以分离老鼠的吗
2. 全血中提取白细胞的方法
3. 求中性粒细胞悬液的制备方法

1、人的中性粒细胞分离液可以分离老鼠的吗

外周血中单个核细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同。淋巴细胞分离液是一种密度介于075∽090之间而近似于等渗的溶液。

　中性粒细胞的分离　 新鲜的外周血或骨髓，用肝素抗凝，经淋巴细胞分离液分离，去除淋巴细胞和单个核细胞，用右旋糖酐（dextran，分子量=7～11 万） 沉降和低渗法去除红细胞，得到纯净的中性粒细胞。

无症状，但从鼻咽部可分离出鼠疫杆菌。见于预防接种者。 [诊断] 对第一例病人及时发现与确诊，对本病的控制与预防极为重要。 （一）流行病学资料 当地曾有鼠间鼠疫流行或有赴疫区史；有接触可疑动物或类似患者。

他们使用了与1959年蚕蛾性诱醇实验相同的配方，从老鼠尿液中分离出了darcin的活跃分子，然后再次在老鼠身上进行实验。重要的是，在单独使用darcin时，起到的效果和使用纯尿液完全相同。

2、全血中提取白细胞的方法

新鲜全血，红细胞裂解液（1：1），颠倒混匀数次，静置5min。10000g，4度，10min。此时可见白细胞沉淀和上层亮红色的液体。加入TRIzol，（106－107细胞加500ul），反复抽吸，直至有大量泡沫产生（细胞裂解的标志之一）。

你可以把血液放在试管上，加入抗凝剂，放置24小时后，你就会发现血液发生了分层现象。试管上层的是血浆，下层是血细胞（包括血小板和红细胞）；中间隔了层白细胞。

直接处理抗凝的全血，即加入如Trizol的裂解液直接往下做。

白细胞计数，全血用稀酸溶液稀释后，冲入计数板，计数，再换算求出每升血液中的白细胞总数。记得要扣除有核红细胞的影响。

3、求中性粒细胞悬液的制备方法

在一15ml离心管中依次加入2ml42%、2ml51%Percoll（均为用PPP新鲜配制）、2~3ml细胞悬液，275gX10min。

冲洗液用70um尼龙筛网过滤，离心收集细胞，600g 4℃ 10min，低减速。

该法可利用1U或2U全血制备，或对一个献血员进行连续采血、分离制备白细胞悬液、回输红细胞和大部分血浆的重复循环（一般4次循环）而制备成单采白细胞悬液。

另外，此法也适合大量粒细胞、淋巴细胞的分离制备，在天然白细胞干扰素诱生和生产中已被广泛应用。

用LKB-1250发光仪（Luminometer）检测。

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