细胞壁缺陷型细菌分离,细胞壁缺陷型细菌的特点和意义是什么?
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1、缺陷型细胞的定义是什么?
细菌细胞壁缺陷型(细菌L型) 细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制,这种细胞壁受损的细菌一般在普通环境中不能耐受菌体内的高渗透压而胀裂死亡。但在高渗环境下,它们仍可存活。
定义不同,形成原因不同。营养缺陷型是指微生物等不能在无机盐类和碳源组成的基本培养基中增殖,补充一种或一种以上的营养物质才能生长。呼吸缺陷型则是指缺乏完整电子传递链的细胞,不能进行正常的有氧呼吸。
形态与结构变异,细胞du壁缺陷型(L型)变异:临床上由于抗菌药物用不当,可使病人体内细菌发生L型变异。
这里的CHO细胞是指DHFR缺陷型的细胞,不含二氢叶酸还原酶基因,不能合成核酸,必须在含有HT的培养基里生长。当转染的目的基因连有dhfr基因时,阳性细胞也就获得了dhfr基因。MTX是二氢叶酸还原酶的抑制剂,可阻碍其作用。
医学上的意义:当细菌细胞壁中的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制这种细胞壁受损的细菌一般在普通环境中不能耐受菌体内部的高渗透压而将胀裂死亡;但在高渗环境下,它们仍可存活而成为细菌细胞壁缺陷型。
2、筛选营养缺陷型细菌的基本步骤和方法及其原理
若想获得某一特定营养缺陷型突变株,只要在基本培养基上加入微量的相应物质就可达到。
富集和分离抗生素敏感菌的营养缺陷型突变株的抗生素法 将抗生素加入原养型培养基(即培养基中缺少营养缺陷型所需的养分)中,能杀死生长中的野生型细胞,而不能生长的突变株得以幸免。
青霉素浓缩法。青霉素 能抑 制细菌 细胞壁 的合 成,因此,用青霉素只能杀死生 长繁殖 中的细 菌,而 不能杀死停 止分裂 的细菌。
采用辐射,化学试剂等因素处理细菌,以提高其变异几率,关键步骤是进行营养缺陷型微生物的筛选工作,营养缺陷型是指通过诱变产生的,由于发生了丧失某酶合成能力的突变,因而只能在加有该酶合成产物的培养基中才能生长的突变株。
氨基酸,维生素,核酸等)的能力,只有在基本培养基中补充所缺乏的营养因子才能生长,成为营养缺陷型(auxotroph)。
3、怎样筛选营养缺陷型菌株
在诱变之后存活的菌体中,存活的营养缺陷型菌株的数量很少,而野生型细胞却大量存在,所以常采用抗生素法和菌丝过滤法来筛选营养缺陷型菌株。
青霉素浓缩法。青霉素 能抑 制细菌 细胞壁 的合 成,因此,用青霉素只能杀死生 长繁殖 中的细 菌,而 不能杀死停 止分裂 的细菌。
【答案】:营养缺陷型指野生型经诱变处理后,由于发生了丧失某酶合成能力的突变形成的菌株,它只能在加入该酶合成产物的培养基中生长;可通过夹层培养法,限量补充培养法,影印接种培养法及逐个检出法筛选除营养缺陷型菌株。
营养缺陷型的筛选方法:一般要经过诱变、淘汰野生型、检出和鉴定营养缺陷型4个环节。第一步,诱变剂处理:用物理或化学诱变剂进行处理。第二步,淘汰野生型:通过抗生素法或菌丝过滤法就可淘汰为数众多的野生型菌株。
以C.glutamicum的IMP合成途径为例,该菌的一个腺苷酸琥珀酸合成酶缺失的腺嘌呤缺陷型,只要在其培养基中补充少量AMP就可正常生长并积累IMP。
4、细菌l型名词解释有哪些?
L型细菌的名称解释是它是一种在特定环境条件下形成的细菌变种。其名称来源于英国微生物学家亚历山大·弗莱明(Alexander Fleming)在1935年发现的青霉素对L型细菌的抑制作用。L型细菌在细胞形态上与原菌株相比有很大的不同。
细菌L型即细菌细胞壁缺陷型,在某种情况下细胞壁肽聚糖结构可遭破坏,或当其合成受到抑制时,形成细胞壁缺陷的细菌,通常将能有效生长和增殖的细胞壁缺陷型细菌称为细菌L型。
L型细菌:一种自发突变形成的细胞壁缺损细菌。它的细胞膨大,对渗透压敏感,在固体表面形成油煎蛋似的小菌落。
细菌细胞壁的肽糖结构直接受到物理、化学或生物因素的破坏或抑制,这种细胞壁受损的细菌一般在普通环境中不能耐受菌体内的高渗透压而胀裂死亡。细胞壁受损并能生长和分裂的细菌称为细菌细胞壁缺陷型或细菌L型。
5、细菌L型有哪些特点?
主要特征是:细菌L型大多染成革兰阴性。细菌L型难以培养,其营养要求基本与原菌相似,但需在高渗低琼脂含血清的培养基中生长。细菌L型生长繁殖较原菌缓慢。
解析:细菌L型即细菌细胞壁缺陷型,由于缺失细胞壁,其形态呈多形性,革兰染色阴性 。细菌L型较原菌相比生长缓慢,一般形成中间较厚、四周较薄的荷包蛋样细小菌落 。分离培养要用高渗的琼脂培养基 。
②颗粒型菌落:整个菌落由透明的颗粒组成并且没有致密的核心。③丝状菌落:菌落中心如典型L型菌落,但周边呈丝状。
【答案】:(1)L型细菌:指在实验室或宿主体内通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株。其细胞膨大,对渗透压敏感。
细菌L型生长缓慢,营养要求高,对渗透压敏感,普通培养基上不能生长,培养时知烂必须用高渗的含血清的培养基。
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