大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于人淋巴细胞分离实验指导书的问题，于是小编就整理了5个相关介绍人淋巴细胞分离实验指导书的解答，让我们一起看看吧。

1. 怎样从肠道淋巴结中分离淋巴细胞?谢谢!
2. 人外周血淋巴细胞分离液怎么用,注意事项
3. 急问:从人血液中分离淋巴细胞
4. 求人外周血B、T淋巴细胞的分离方法
5. 怎么分离出人体血清里的淋巴细胞?

1、怎样从肠道淋巴结中分离淋巴细胞?谢谢!

淋巴细胞分离的主要方法有黏附贴壁法、吸附柱过滤法、磁铁吸引法、Percoll分离液法。

从PBMC中分离淋巴细胞的方法有：（1）贴壁粘附法；（2）吸附柱过滤法；（3）磁铁吸引法；（4）Percoll分离液法。

先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物，然后用CD4 T细胞的单抗，免疫磁珠法分离；或者利用流式细胞仪进行分选。

小鼠的没有做过，可以参考人的，肠壁中固有层有许多的淋巴细胞，所谓固有层其实就是位于肠腔上皮下方，这里从小肠开始至结肠，开始没有淋巴小结，然后逐渐增多，如果有2个以上的淋巴小结在一起就叫做集合淋巴小结。

2、人外周血淋巴细胞分离液怎么用,注意事项

　在短中管中加入适量淋巴细胞分离液。　取肝素抗凝静脉血与等量Hank；s液或RPMI1640充分混匀，用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，注意保持清楚的界面。水平离心2000rpm×20分钟。

　在15mL离心管中加入5mL淋巴细胞分离液Ficoll。　取5mL抗凝静脉血与5mL无菌PBS按照1：1充分混匀，用移液管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，动作一定要轻，注意保持清楚的界面。

用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞（PBMC）。用预温的RPMI-1640 培养液洗涤细胞两次，每次离心400×g 10分钟，去上清液。用含5%小牛血清和1%（v/v）PHA的RPMI-1640培养液将细胞稀释至5×106/ml。

取血后，静置1-2小时，置于离心机内以3000P/m离心15分钟，用移吸管吸出分离的血清（上层乳黄色的上清液），置于4℃冰箱保存。测定时移至室温下30分钟解冻。剩下的应该是血浆了。淋巴细胞不可能从剩下的血浆分离了。

3、急问:从人血液中分离淋巴细胞

　在短中管中加入适量淋巴细胞分离液。　取肝素抗凝静脉血与等量Hank；s液或RPMI1640充分混匀，用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，注意保持清楚的界面。水平离心2000rpm×20分钟。

【答案】：B 单个核细胞的比重为075～090，红细胞和粒细胞的比重在092左右，选择一种比重介于075～092之间的分层液即可将细胞分离，一般Ficoll分层液的比重在077左右。

差速离心法是无法分离B细胞的。可以采用抗体标记来分离。根据抗体所标记的物质不同，一般有两种方法：标记了磁珠，颗粒通过吸附。标记了荧光素，则可以通过流式分选。

血小板不同，介于1．075～1．099之间，红细胞和粒细胞在1．092左右，血小板在1．030～1．035之间，因而利用比重介于1．075～1．092之间，近于等渗的溶液做密度梯度离心，使一定比重的细胞按相应密度分布而加以分类。

4、求人外周血B、T淋巴细胞的分离方法

先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物，然后用CD4 T细胞的单抗，免疫磁珠法分离；或者利用流式细胞仪进行分选。

PBMC分离方法是一种生物技术，它可以将多种血液成分（如红细胞、血小板和淋巴细胞）分离出来，从而获得血液中纯的单克隆T细胞。

取新鲜抗凝血1ml，与生理盐水1：1 混匀后，小心加于2ml细胞分离液之液面上；以400g（约1500转/分，半径15cm水平转子）离心20分钟，此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层：为血浆层。

外周血中除红细胞外，还有粒细胞、单核细胞和淋巴细胞及血小板等，通常是分离这些血细胞的重要来源。其分离方法有四种：自然沉降法、差异沉降法、氯化铵分 离法、Ficoll分离法。

5、怎么分离出人体血清里的淋巴细胞?

无菌抽取静脉血2ml，去掉针头注人含有肝素的无菌试管中摇匀，加入2ml Hanks溶液进行对倍稀释，混匀。

方法：在短中管中加入适量淋巴细胞分离液。取肝素抗凝静脉血与等量Hank；s液或RPMI1640充分混匀，用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，注意保持清楚的界面。水平离心2000rpm×20分钟。

　在短中管中加入适量淋巴细胞分离液。　取肝素抗凝静脉血与等量Hank；s液或RPMI1640充分混匀，用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，注意保持清楚的界面。水平离心2000rpm×20分钟。

外周血中除红细胞外，还有粒细胞、单核细胞和淋巴细胞及血小板等，通常是分离这些血细胞的重要来源。其分离方法有四种：自然沉降法、差异沉降法、氯化铵分 离法、Ficoll分离法。

可用淋巴细胞分层液，分出来就可以了，加淋巴细胞刺激因子、小牛血清培养就OK了。我们的研究生都用自己的或同学的血，互相帮助，还是比较好找的。

到此，以上就是小编对于人淋巴细胞分离实验指导书的问题就介绍到这了，希望介绍关于人淋巴细胞分离实验指导书的5点解答对大家有用。