细胞分离的动物实验过程-细胞分离实验操作

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是活细胞增殖其数目由一个细胞分裂为两个细胞的过程。分为有丝分裂和无丝分裂。

根据查询精英家教网显示：首先是细胞核分裂，在细胞核分裂过程中有染色体复制加倍的现象。

其典型过程是核仁首先伸长，在中间缢裂分开，随后核也伸长并在中部从一面或两面向内凹进横缢，使核变成肾形或哑铃型，然后断开一分为二。

这个细胞的分裂过程顺序如下：染色体进行复制加倍，随着动物细胞分裂的进行，染色体分成形态和数目相同的两份，分别进入两个新细胞中。细胞核分成两等份。细胞质由一份分成两份，每一份中含有一个细胞核。

动物细胞分裂的方式：有丝分裂：有丝分裂是动物细胞中常见的分裂方式，主要发生在细胞周期的间期和前期。它是一个复杂而精确的过程，旨在将遗传物质平均分配到两个子细胞中，确保遗传信息的完整性和稳定性。

操作要迅速，控制好离心速度和时间。弃上清时不要把沉淀荡起。加氯化钠溶液时应用胶头滴管吹匀混合液，力气不能过大，以免造成叶绿体破碎。

控制温度：在分离过程中，应尽量避免高温或低温的影响。因为这些因素都会影响叶绿体的质量和数量。

分离细胞器的方法有多种，其中最常用的是差速离心法。这种方法是通过逐渐增加离心机的转速和时间，使细胞器在不同转速下分离出来。将细胞样品放入离心管中，然后在低速离心机中离心一段时间，使细胞沉淀下来。

分离过程最好在0～4℃的条件下进行；如果在室温下，要迅速分离和观察。

一）解离：剪取洋葱根尖5cm，放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精混合液（体积比为1：1）的玻璃皿中，在室温下解离3～5min。（二）染色：把根尖放在盛有0.01g/ml龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3～5cm。

实验步骤（1）将洋葱根尖培养至长1～5 cm。（2）制作临时装片：剪取根尖 2～3 mm→解离 3～5 min→清水漂洗约 10 min →染色 3～5 min →压制装片。

低倍镜观察把制成的洋葱根尖装片先放在低倍镜下观察，慢慢移动装片，找到分生区细胞，其特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。

主要用于固定植物材料。比如我们已经把洋葱根培养到合适的时期了，可是没有时间进行实验。那么我们就可以把洋葱根尖剪下来，用固定液杀死里面的细胞，达到固定细胞、使细胞里的分裂相固定在该时期的目的。

分离门静脉和肝下下腔静脉，分别插管，从门静脉注入肝素，使大鼠全身肝素化。

如果血细胞去的非常干净，可以不用percoll分离 3，用低速离心（50g 2 min），死细胞在上层。台盼蓝检测后基本95%以上活性。我分离的通常在99%以上活性。成鼠肝细胞元代培养很难增值，但是维持1个月没问题。

许多实验室喜欢用组织块培养法进行原代培养，因为方法简单，细胞也较容易生长。尤其是培养心肌，有时还可观察到心肌组织块搏动。细胞从组织块边缘向外长出并铺满培养皿或培养瓶后，即可进行传代。

肝细胞分离，有两个问题要注意的，就是一定尽量要快，时间长了影响细胞活力；另一个就是操作最好在冰上进行，还有大鼠要小点的，150-200g就可以了。消化应的问题，还是自己摸索为好，如果觉得多了可以试着减少用量吧。

比较洋葱根尖细胞和马蛔虫受精卵细胞的有丝分裂过程，可知植物细胞和动物细胞的有丝分裂在两个方面有所不同，应注意：（1）植物细胞中无中心体，分裂时无星体出现，而动物细胞则有。

观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。初步掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片的技能。初步掌握绘制生物图的方法。

实验原理：a.在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的，因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。

在细胞分裂的过程中，两组中心粒分别移向细胞的两极。在这两组中心粒的周围，发出无数条星射线，两组中心粒之间的星射线形成了纺锤体。动物细胞在有丝分裂间期中心体复制，植物细胞中心体则没有复制。

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