淋巴细胞分离及NK细胞杀伤-淋巴细胞分离技术在临床有哪些应用
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1、NK细胞杀伤活性低下的人,肿瘤发生率明显比其他人高?
这项研究通过分析上千人中NK细胞杀伤活性的水平,发现NK细胞杀伤力低下者肿瘤发生率明显提高。该项研究前瞻性地观察了11年,上千人群当中NK细胞的杀伤活性的高中低,然后去看这些人后续发生肿瘤的情况。
免疫力低下的身体易于被感染或患癌症;免疫力超常也会产生对身体有害的结果,如引发过敏反应、自身免疫疾病等。
损伤免疫功能:吸烟可损伤人体的免疫功能,这种损伤与吸烟者感染和肿瘤发生率升高呈正相关。人体免疫系统之所以能发挥其免疫功能,是因为该系统中有一种自然杀伤细胞-NK淋巴细胞,它可直接抑制和杀灭癌细胞。
日本学者Kazue Imai等2000年报道,通过11年的跟踪随访和研究3500多例人群,发现人外周血NK细胞活性的高低与肿瘤发生率密切相关,NK活性率越高,肿瘤发生率越底;反之亦然。
2、免疫细胞分类及分离方法
免疫细胞T 细胞及B 细胞的分离 将淋巴细胞悬液通过尼龙棉柱,B 细胞粘附于尼龙棉上,T细胞则不粘附,先用RPMI l640 培基洗脱尼龙棉柱,流下的细胞悬液含有丰富的T 细胞。
包括粒细胞、单核巨噬细胞、NK细胞、γδT细胞,以及T细胞和B细胞。粒细胞、单核巨噬细胞、NK细胞、γδT细胞是参与机体非特异性免疫作用的主要细胞。
B-1细胞主要识别胸腺非依赖性抗原(TI抗原),即非蛋白质类抗原如脂类、多糖抗原等,这些抗原可直接激活B细胞,无需Th细胞的辅助。B-2细胞介导对胸腺依赖性抗原(TD抗原)即蛋白质抗原的免疫应且须有Th细胞的辅助。
收集的脱落细胞经洗涤后悬浮在RPMI l640 培基中备用。CD4 细胞亦可用此法分离。 用微生态制剂提高免疫力的研究和使用由来已久。
3、NK细胞如何杀伤靶细胞
综上NK细胞和巨噬细胞都能够通过细胞因子途径(如TNF-α)和ADCC效应杀伤靶细胞,但NK细胞特有穿孔素/颗粒酶途径以及Fas/FasL途径,这两者能够更为高效地杀伤靶细胞。
穿孔素储存于CTL细胞和NK细胞的胞浆颗粒中,是这些细胞杀伤靶细胞的主要效应分子。
介导杀伤细胞直接杀伤靶细胞。延伸:作用过程 IgG抗体与靶细胞表面的抗原决定簇特异性地结合。之后自然杀伤细胞(NK细胞)借助其表面相应的受体与结合在靶细胞上的IgG Fc段结合。
之后自然杀伤细胞(NK细胞)借助其表面相应的受体与结合在靶细胞上的IgG Fc段结合。活化的NK细胞释放穿孔素、颗粒酶等细胞毒物质杀伤靶细胞。靶细胞发生细胞凋亡,抗体被肝处理。
通过释放蛋白水解酶杀伤病毒感染的靶细胞。nk细胞所不具备的生物学功能有通过释放蛋白水解酶杀伤病毒感染的靶细胞,nk细胞是自然杀伤细胞,是体内固有的免疫细胞,具有很强的免疫性及杀伤性。
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