葡聚糖沉淀分离细胞(葡聚糖层析sephadex)
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1、请教:小鼠单个核细胞分离及Ficoll
目的是使其彼此分离。将小鼠脾脏中各种不同比重的细胞通过离心沉降而达到使其彼此分离的目的。根据物理学颗粒沉降原理,不同密度的颗粒在其沉降运动中可因其比重的差别而处于不同的分布位置。
小鼠脾脏单个核细胞的活性鉴定的目的是掌握小鼠脾脏单个核细胞的分离和淋转的原理,方法是台盼蓝染色。
【答案】:C Ficoll分离液法主要用于分离外周血中的单个核细胞,是一种单次差速密度梯度离心的分离法。
【答案】:D Ficoll分层液的层次由上到下依次为:血浆层、单个核细胞层、Ficoll液层、粒细胞层和红细胞层。Percoll分层液的细胞分布由上到下依次为:死细胞层、单核细胞组分层、淋巴细胞组分层、红细胞与粒细胞组分层。
【答案】:A Ficoll是聚蔗糖一泛影葡胺,是依据细胞的密度不同(比重不同),通过密度梯度离心将各种细胞分离的。
2、葡聚糖凝胶分离糖,苷的原理
该物质分离黄酮苷化合物的主要原理是分子筛、氢键吸附。葡聚糖凝胶层析法是一种常用的分离技术,主要原理是分子筛和氢键吸附。
Sephadex是葡聚糖凝胶,用于分离不同分子量的物质,G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。例如,G-25为每克凝胶膨胀时吸水5克,同样G-200克每克千胶吸水20克。
基本原理:凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析。是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。
凝胶色谱法分离原理:一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动:垂直向下的移动和无定向的扩散运动。
葡聚糖凝胶层析,是使待分离物质通过葡聚糖凝胶层析柱,各个组分由于分子量不相同,在凝胶柱上受到的阻滞作用不同,而在层析柱中以不同的速度移动。
3、利用葡聚糖凝胶柱层析法分离黄酮苷类化合物主要原理
葡聚糖凝胶的分离原理。葡聚糖凝胶的分离原理是葡聚糖凝胶在吸水后形成凝胶粒子,在其交联键的骨架中有许多一定大小的网眼。网眼大,大分子物质能进入网眼内;网眼小,只有小分子物质才能进入网眼;而超过一定限度的大分子物。
硅胶柱层析原理:硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离, 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
葡聚糖凝胶柱色谱:分离游离黄酮时,主要靠吸附作用,凝胶对化合物的吸附程度取决于游离酚羟基的数目,羟基数目越多,越难被洗脱;分离黄酮苷时,则分子筛的性质起主导作用,分子量大的先流出柱体。
凝胶色谱又叫排阻色谱,用的是葡聚糖凝胶的孔径大小不一,来对大分子化合物进行分类。分子大的,不能通过凝胶的内部孔的,最先流出,分子小的,可以进入孔中的,会被凝胶保留,会较晚流出。
4、谁知道植物细胞的分离过程?
植物细胞分裂的过程是:细胞核分裂→细胞质分裂→新细胞膜→新细胞壁。具体解释:细胞核分裂:细胞核分裂是一个连续的过程,从细胞核内出现染色体开始,经一系列的变化,最后分裂成二个子核(daughternucleus)为止。
有丝分裂(俗称有丝分裂):此阶段分为前期、中期和后期。在前期,染色体会变得更加紧密,并且核膜开始消失。在中期,每对染色体会分离到细胞的两端,并形成纺锤体。在后期,染色体进一步分离,并且细胞开始分裂。
后期:细胞分裂的后期,每一个着丝点分裂成两个,原来连接在同一个着丝点上的两条姐妹染色单体也随着分离开来,成为两条子染色体。纺锤丝牵引着子染色体分别向细胞的两头移动。
纺锤体完全形成时期。后期:后期是各个染色体的两条染色单体分开,分别由赤道移向细胞两极的时期。末期:为形成二子核和胞质分裂的时期。
分裂末期:核膜、核仁出现,纺锤体消失,植物在赤道板出长出细胞板,最终成为新细胞壁使细胞一分为二,动物细胞细胞膜凹陷,细胞缢裂.。无丝分裂(如蛙的红细胞):细胞核一分为二,整个细胞再缢裂。
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