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1. 核质分离原理
2. 如何分离细胞核与线粒体
3. 动物细胞融合、细胞核的分离与鉴定
4. 描述细胞核的分离过程与鉴定结果

1、核质分离原理

核粗提物处理：取步骤4的核粗提物沉淀，加入100μl CEB-A和5μl CEB-B震荡10s洗涤沉淀，冰浴1min，1000g 5min弃上清。再次加入100μl CEB-A和5μl CEB-B重复此步骤。

收集细胞或组织，并进行核质分离。分别测量核和细胞质中目标分子的浓度或含量，例如用免疫印迹法或荧光染色法测量蛋白质含量，或用分子生物学技术测量核酸含量。

核质分离的时候核加了裂解液后粘稠是传统的裂解液法。

原理：（1）提取原理：色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中。（2）分离原理：各种色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之，则慢。

细胞核的主要组成部分由染色体和核质组成。染色体 染色体是细胞核中最重要的组成部分之一。它们由DNA、蛋白质和一些其他分子组成。染色体是线状的结构，它们在细胞分裂时起着重要的作用，负责遗传信息的传递。

2、如何分离细胞核与线粒体

细胞核和线粒体分离的时候正常来说用到的方法都是差速离心法，还有要通过吸水胀破的形式才会让细胞中的这些物质流出来。

细胞器的分离主要用到的是离心技术。主要用到：（一）、差速离心 在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心，用于分离不同大小的细胞和细胞器。

运用差速离心法分离细胞器，细胞器沉降由上到下的顺序依次为：核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、最后为核蛋白体。

离心是研究如细胞核、线粒体、高尔基体、溶酶体和微体，以及各种大分子基本手段。一般认为，转速为10~25Kr/min 的离心机称为高速离心机；转速超过25Kr/min，离心力大于89Kg者称为超速离心机。

3、动物细胞融合、细胞核的分离与鉴定

实验原理： 在诱导物（如仙台病毒，聚乙二醇）作用下，相互靠近的细胞发生凝集，随后在质膜接触处发生质膜成份的一系列变化，主要是某些化学键的断裂与重排，进而细胞质沟通，形成一个大的双核或多核细胞。

结果应该是有蛋白质，DNA，脂类物质。涂片的不同应该是细胞核的有无，染色后的分布。差速离心只用于分离大小悬殊的细胞，更多用于分离细胞器。通过差速离心可将细胞器初步分离，常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。

其次，植物细胞融合后形成的杂种细胞，经过培养有可能分化发育成植株，而动物细胞的杂种细胞则缺乏此种能力。

细胞融合的具体步骤包括：（1）细胞准备，分贴壁和悬浮细胞两种。前者可直接将两亲本细胞混合培养，后者需制成一定浓度的细胞悬浮液。（2）细胞融合，加促融因子于将行融合的细胞之中，诱导融合。（3）杂种细胞选择。

4、描述细胞核的分离过程与鉴定结果

细胞松弛素主要是破坏细胞骨架结构，细胞松弛素特异性的结合到微丝上，阻断微丝的组装。使得微丝去组装的速度大于组装速度，从而使微丝解体。有利于细胞核分离。

眼虫营分裂生殖时，核进行有丝分裂，分裂过程中核膜并不消失，随着细胞核中部收缩分离成两个子核，然后细胞由前向后纵裂为二（纵二分裂），其中一个带有原来的一根鞭毛，另一个又长出一根新鞭毛，从而形成两个眼虫。

将①、②、③涂片用l％甲苯胺兰染色后盖片即可观察。结果 分别于高倍镜下观察三张涂片，描述镜下所见。

单个核细胞分离实验报告的写作应按照以下步骤进行：实验目的：明确实验的意义和作用。实验原理：阐述实验的依据和方法。实验步骤：详细记录实验过程。

前期； 是细胞分裂的开始。细胞外形一般变圆，中心体的中心粒分离，并向细胞的两极移动。四周出现发射状细丝。核膨大、脱氧核糖酸增多，核染色加深，不规则的染色质形成丝状染色体，并缩短变粗。

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