细胞分离工程学基础第二版(细胞分离技术的应用)
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1、一、简述干细胞分离纯化的主要方法 二、简述干细胞体内体外的检测方法...
分离细胞,进行细胞培养,并对其分化进行控制,通常采用加入生长因子或向细胞内引入新基因的方法,进而观察细胞的分化方向。
目前常用的分离MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度离心法,全骨髓法即根据干细胞在低血清培养基中有贴壁优势特性,定期换液除去不贴壁细胞,从而达到纯化及扩增MSC的目的。
通过贴壁法或percoll等细胞分离介质只能获得混合的骨髓基质细胞,只有应用免疫磁珠、流式细胞仪等将其进一步分离纯化后,才能称为骨髓间质干细胞。
材料和方法: MSCs体外分离培养:将肝素抗凝的骨髓用密度梯度离心 法(过percoll细胞分离液)分离出单个核细胞,体外培养贴壁细胞,传3代后得 到纯度和数量均较高的MSCs,经60Co照射后作为实验细胞。
这时如果将组成桑椹胚的细胞一一分开,并分别植入到母体的子宫内,则每个细胞都可以发育成一个完整的胚胎。这种细胞就是胚胎干细胞,属于全能干细胞。骨髓、脐带、胎盘和脂肪中则可以获取组织干细胞。
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