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分离原代细胞要去除红细胞,原代细胞分离纯化的实验结果

分离原代细胞要去除红细胞,原代细胞分离纯化的实验结果

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  1. ficoll分离液里有没有裂解红细胞的成分

1、ficoll分离液里有没有裂解红细胞的成分

标准方法:Ficoll-泛影钠(Ficoll-Hypaque)密度梯度及红细胞裂解法1)取一50ml聚乙烯管,无菌采集人外周静脉血,加4ml8%或5%的柠檬酸盐液定容至40ml。上述全血300gX20min,离心, 室温。

Ficoll是由GE Healthcare公司拥有的注册商标。通常Ficoll 是Ficoll-Paque试剂的一部分,而是Ficoll-Paque则是在生物实验室用于分离血液及其成分(红细胞,白细胞等)的试剂。而Ficoll亦可以用于从胰组织中分离胰岛。

利用渗透压除掉红细胞( 可用氯化铵溶液)然后离心取白细胞沉淀 或者 用Ficoll密度梯度离心(400g左右)。 白细胞在血浆与红细胞层之间。

此法 分离的细胞纯度也不高。氯化铵分离法:0.83%氯化铵(NH4CL)可使红细胞破裂,通常将分离获得的粒细胞。淋巴细胞中混有的少量的红细胞用0.83%氯化铵进行裂 解,以排除红细胞的干扰。

梯度密度离心法梯度密度离心法常用的分离液有Ficoll、Fercoll、戊糖等,Ficoll是最适合于分离细胞的分离液。Ficoll主要成分是一种合成的蔗糖聚合物,具有高密度、低渗透压、无毒性的特点。

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