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分离小鼠nk细胞,小鼠nk细胞的标志

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  1. 如何从小鼠脾细胞中获得NK细胞

1、如何从小鼠脾细胞中获得NK细胞

比如在效靶比为25比1时,NK细胞对K562细胞的杀伤率为百分之635,而如果以L929细胞为靶细胞,一般按20比1的效靶比加入正常鼠脾细胞为效应细胞。然后通过MTS和MTT比色法平行测定小鼠NK细胞活性。

这是个简单实验,得到细胞量很大,能见到明显的淡红色,基本不会出现问题。观察不到细胞可能是液体加的多,离心弃上清即可。保证用的液体是缓冲液,Hanks液和PBS都可以。氯化钠会胀破细胞。别的我也想不到了。

提取脾细胞:等小鼠产生了足够的抗体后,通过牺牲小鼠,取出其脾脏并将其分离为单个细胞。融合:将小鼠脾细胞与肿瘤细胞(如SP2/0或NS0细胞)融合,形成杂交瘤细胞。

便宜的方法是ficoll密度梯度离心,将脾脏匀浆成单细胞后分离,但不太纯,包含少量粒细胞,还有单核细胞,大部分是淋巴细胞。

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