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1. 大鼠原代肝细胞分离,活率一直上不去,求助大神

1、大鼠原代肝细胞分离,活率一直上不去,求助大神

肝细胞分离，有两个问题要注意的，就是一定尽量要快，时间长了影响细胞活力；另一个就是操作最好在冰上进行，还有大鼠要小点的，150-200g就可以了。消化应的问题，还是自己摸索为好，如果觉得多了可以试着减少用量吧。

如果血细胞去的非常干净，可以不用percoll分离 3，用低速离心（50g 2 min），死细胞在上层。 台盼蓝检测后基本95%以上活性。我分离的通常在99%以上活性。成鼠肝细胞元代培养很难增值，但是维持1个月没问题。

阻断肝上下腔静脉（位置较深，分离结扎有难度，可用哈巴狗血管夹夹住，亦可用消毒棉签压迫）5，从门静脉内注入D-HANKS，直至肝下下腔静脉插管内流出来的液体中不含或含少量红细胞，肝脏呈米黄色。

应该是空压机的限压装置限定在了5上面。建议先把空压机的限压装置调整到想要的压力值上面去，然后再看空压机压力变化状态。

原代培养技术在中医药研究中的应用 综合近十年来的文献报道，体细胞、血细胞和肿瘤细胞的原代培养技术较为成熟，已被应用于中医药的研究之中，尤其是肝细胞和神经细胞的原代培养，其应用更为广泛。

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