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1. 将细胞分离的原理有哪些?各有什么特点
2. 如何用流式细胞仪分离肺泡上皮细胞
3. 流式细胞术的原理和应用
4. 流式细胞术的基本原理
5. 说明对不同细胞组分进行分级分离所用方法的基本原理。

1、将细胞分离的原理有哪些?各有什么特点

结构特点：圆形、卵形、纺锥形或多形性的吞噬细胞，嗜碱性细胞质富含核糖体、线粒体、液泡等，细胞核具嗜伊红颗粒。

局部分泌：这是所有分泌性细胞的共有分泌方式。

浆细胞大多见于消化管和呼吸道固有膜的结缔组织内。细胞较小，圆形或卵圆形，核圆但偏于细胞一侧，染色质粗，沿核膜呈辐射状排列成车轮状。细胞质呈嗜碱性，染为蓝色。在靠近核处，有一着色浅的区域。

结构决定功能”是生物学的基本原理之一，细胞若具有某种结构，就应该具有该结构所对应的生理功能。若发现细胞具有某种功能，也可以反映出细胞应该具有哪些结构以及该结构的特点。

成熟B细胞接受抗原刺激后，在抗原提呈细胞和Th细胞的辅助下成为活化B细胞，进而分化为浆细胞，合成和分泌各类免疫球蛋白，同时表达浆细胞抗原-1等浆细胞特异性标志，而mIg、MHCⅡ类分子、CD1CDCD21等标记消失。

2、如何用流式细胞仪分离肺泡上皮细胞

在实际使用中，仪器首先要对光散射信号进行测量。当光散射分析与荧光探针联合使用时，可鉴别出样品中被染色和未被染色细胞。光散射测量最有效的用途是从非均一的群体中鉴别出某些亚群。

酶消化法：利用离心机对不同密度的细胞进行分离。优点：分离效果好，速度快。缺点：离心需要繁琐的操作，不能完全分离所需的细胞类型。流式细胞术：利用流式细胞仪对细胞进行单个分选。

流式细胞术是利用流式细胞仪对于处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒同时进行多参数、快速定量分析和分选的高新技术。其特点是：第一，只要样本制备成单个细胞或生物颗粒悬液均可以分析。

细胞分选**：流式细胞仪能够分选某一亚群细胞，分选纯度95%。目前细胞分选主要用于研究，临床应用较少。利用流式细胞仪分选免疫担当细胞进行细胞免疫学研究也是目前的热门课题。

3、流式细胞术的原理和应用

原理：细胞标记：通过将目标细胞表面或内部特定结构与荧光染料结合，使其在激光束照射下发出荧光信号。这些荧光标记物可以是抗体、DNA探针或别的化学染料。

流式细胞术能在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，具有速度快、精度高、准确性好的优点。

主要应用于各种生物医学研究和临床诊断。国际上通用的白细胞和淋巴瘤的诊断标准就是靠流式细胞仪的分型来确定的。

流式细胞术是一种利用流式细胞仪对细胞进行分析和排序的技术。它是一种高通量、快速、精确、灵敏的细胞分析技术，被广泛应用于生物医学研究领域。

流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。

4、流式细胞术的基本原理

FSC通道 FSC，即前向角散射，它的值代表细胞的 大小 。所以可以利用细胞的FSC值初步比较细胞的大小，利用FSC值对细胞进行分群和分类。SSC通道 SSC，即侧向角散射，它的值代表 细胞的颗粒度 （granularity）。

流式细胞术是利用流式细胞仪对于处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒同时进行多参数、快速定量分析和分选的高新技术。其特点是：第一，只要样本制备成单个细胞或生物颗粒悬液均可以分析。

流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。

流式细胞术的基本原理是通过细胞特异性荧光染色或其他标记技术，将细胞分为不同的群体，并利用流式细胞仪进行多参数分析和排序。

5、说明对不同细胞组分进行分级分离所用方法的基本原理。

各种组分的沉降系数不同，所以用差数离心来分离。

离心法的原理是，不同种类的细胞，其大小、形态、密度、质量等物理性质不同，在离心力的作用下，它们具有不同的沉降速率，从而得以分离。亲和法分离细胞是利用一些细胞对玻璃或塑料具有较大的粘附力的特点。

细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。

细胞内不同结构的比重、大小和形态都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同。根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种亚细胞组分分级分离出来。沉降速度：细胞核线粒体微粒体。

机械法：利用物理外力，如切、割、压、挤、拉、撕、旋等方法，将细胞分离开。优点：操作简单，不使用有毒和致癌物质。缺点：对于细胞脆弱的情况，会造成细胞损伤。

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