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1. 75%Ficoll Hypaque淋巴细胞分离液怎么配置

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淋巴细胞分离液的比重就是077不需要稀释，在一定离心力的作用下，比重大于淋巴细胞的红细胞及多核细胞等沉淀于分离液的底层，而淋巴细胞留在分离液的上界面。

用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一15ml离心管中，向离心管中加入10ml清洗液混匀细胞。250g，离心10min。弃上清。用吸管以5ml清洗液重悬所得细胞。250g，离心10min。

　在15mL离心管中加入5mL淋巴细胞分离液Ficoll。　取5mL抗凝静脉血与5mL无菌PBS按照1：1充分混匀，用移液管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，动作一定要轻，注意保持清楚的界面。

吸取2ml淋巴细胞分层液置于刻度离心管中，然后将离心管倾斜45O角，用毛细滴管将稀释的全血沿管壁缓慢加至分离液上面，应注意保持两者界面清晰。在18℃～20℃下，用水平离心机以2000r/min离心20min。

现以淋巴细胞分离为例，方法 如下。取中心血站供应的抗凝血细胞或初步分离的白细胞黄层细胞悬液，用无钙、镁离子的PBS稀释3-4倍。将Ficoll淋巴细胞分离液事先分装于离心管中，使其沉于管底，并在37℃中预热。

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