分离血小板白细胞,分离血小板需要多少血液
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1、如何将白细胞和血小板进行分离
外周血中除红细胞外,还有粒细胞、单核细胞和淋巴细胞及血小板等,通常是分离这些血细胞的重要来源。其分离方法有四种:自然沉降法、差异沉降法、氯化铵分 离法、Ficoll分离法。
将富血小板血浆转入塑料试管,3500rpm/1200g离心5min。弃去上层血浆,用血小板洗涤液洗涤3次。梯度密度离心法梯度密度离心法常用的分离液有Ficoll、Fercoll、戊糖等,Ficoll是最适合于分离细胞的分离液。
早期的血小板分离技术主要是根据血小板的物理属性如密度等进行分离的,用2010年的标准看,其分离的灵敏度及分辨率都不高,以离心为主要手段的分离方法仅能除去70%-95%的白细胞,且血小板损失量较大,一般血小板回收率为70%。
因为方法3只能获得80-85%纯度的中性粒细胞,可以把方法2与方法3联合对中性粒细胞进行纯化。2) 收集从方法3 dextran沉降所得到的富含白细胞的血浆,275g*6min,离心。
从合格的供血者身上采集血液样本,通常是通过静脉穿刺采集,将采集到的全血样本进行离心分离,将血小板与其他成分(如红细胞和白细胞)分离开来。
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