分离小鼠肝星状细胞-percoll分离肝星状细胞
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1、请教肝星状细胞的培养
当肝脏受到炎症或机械刺激等损伤时,肝星状细胞被激活,其表型由静止型转变为激活型。刚开始(0天)如下图没有触角,7天以后它才会完全分化,长出触角,这样有利于下一步肝损伤的研究。
一般细胞都需要在有血清的环境中才可以生长良好,如果在实验过不添加血清,细胞的生长会变差变慢,根据细胞对血清的敏感程度而定存货时间,一般1天左右,细胞就会开始变得不舒展,而3天时一般会死亡。
DMEM/F12培养基好。DMEM/F12培养基是一种常用的培养基,可以用于小鼠原代肝脏细胞的培养。DMEM/F12培养基富含氨基酸、维生素和矿物质等营养成分,可以支持小鼠肝脏细胞的生长和繁殖。
使用来源于条件敲除小鼠肝中的HSCs培养上清处理肝细胞与正常细胞上清相比,能够减少酒精诱导的脂滴形成。从NRP-1敲除的HSCs上清液中脂肪因子和炎症蛋白阵列显示Igfbp3显著降低,SerpinA12表达上调。
肝脏细胞培养专家齐氏生物建议,肝星状细胞分离对扎针对精准度和速度要求很高,首先要找到灌注的肝门静脉,下针一定要快,因为老鼠被注射麻药处于深度麻醉状态,会引起血管收缩和肝部血流量减少,快速插针,才能防止凝血现象。
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