特异性分离巨噬细胞cd分子,巨噬细胞特异性敲除
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1、巨噬细胞的分离方法
【答案】:D 考点:巨噬细胞的分离。[解析]已知有关细胞黏附能力为:巨噬细胞或单核细胞树突状细胞B细胞T细胞=红细胞,利用单核细胞的这个特性可以将其与其他细胞分离开。
单核局势细胞的分离 巨噬细胞培养具有贴壁生长的特性,将上述PBMC至于细胞培养瓶中培养,淋巴细胞悬浮于培养液中,可以祛除,贴壁生长的就是单核巨噬细胞了。
使动物体微倾向一侧,使腹腔中液体集于针头下吸取入针管内,小心拔出针头,把液体注入离心管中,250g4℃离心10分钟,去上清,加10mlEagle培养基,计数细胞,每只小鼠可产生20~30×105细胞,其中90%为巨噬细胞。
人巨噬细胞可从外周血或经斑蝥激发的皮疱液中获取,也可从肺灌洗液或患者腹膜透析液中分离,但操作繁锁,得量不多。
加入3倍体积0.1%DTT于37度水浴中裂痰15分钟,再加入等体积pbs稀释。100目滤网过滤,离心,400g,5分钟。含10%FBS的1640重悬,铺板。贴壁2小时后用pbs洗去未贴壁细胞,得到较纯的肺泡巨噬细胞。
2、医用免疫学选择题求答案
外毒素:是细菌在生长过程中分泌到菌利外的毒性物质。毒性极强,对组织细胞有高度选择性,引起特殊的临床表现,外毒素为蛋白质,有很强的免疫原性,能刺激机体产生相应抗体。如:破风外毒素、白喉外毒素。
NK细胞通过自然杀伤和ADCC发挥的细胞毒作用,在机体抗病毒感染、免疫监视中起重要作用。(1) 抗病毒感染: NK可选择性地杀伤病 毒感染的靶细胞。
一些病原微生物也可直接由巨噬细胞识别、吞噬。
3、免疫细胞分类及分离方法
免疫细胞T 细胞及B 细胞的分离 将淋巴细胞悬液通过尼龙棉柱,B 细胞粘附于尼龙棉上,T细胞则不粘附,先用RPMI l640 培基洗脱尼龙棉柱,流下的细胞悬液含有丰富的T 细胞。
包括粒细胞、单核巨噬细胞、NK细胞、γδT细胞,以及T细胞和B细胞。粒细胞、单核巨噬细胞、NK细胞、γδT细胞是参与机体非特异性免疫作用的主要细胞。
B-1细胞主要识别胸腺非依赖性抗原(TI抗原),即非蛋白质类抗原如脂类、多糖抗原等,这些抗原可直接激活B细胞,无需Th细胞的辅助。B-2细胞介导对胸腺依赖性抗原(TD抗原)即蛋白质抗原的免疫应且须有Th细胞的辅助。
收集的脱落细胞经洗涤后悬浮在RPMI l640 培基中备用。CD4 细胞亦可用此法分离。 用微生态制剂提高免疫力的研究和使用由来已久。
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