淋巴细胞分离没有出现分层(淋巴细胞的分离有什么意义)
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1、用淋巴细胞分离液分离全血的白细胞,结果整管呈红色无明显分层也没有弥散...
这样的样本不适合提取RNA。首先,你分离的白细胞质量不好。提RNA最好用新鲜样本。
.83%氯化铵(NH4CL)可使红细胞破裂,通常将分离获得的粒细胞。淋巴细胞中混有的少量的红细胞用0.83%氯化铵进行裂 解,以排除红细胞的干扰。另外,此法也适合大量粒细胞、淋巴细胞的分离制备,在天然白细胞干扰素诱生和生产中已被广泛应用。
方法 无菌抽取静脉血2ml,去掉针头注人含有肝素的无菌试管中摇匀,加入2ml Hanks溶液进行对倍稀释,混匀。 用吸管吸取稀释血液沿试管壁缓缓加到含有2ml淋巴细胞分离液的试管中(血液:Hanks液:淋巴细胞分离液的比例为1:1:1),沿管壁流下的稀释血液叠加在分离液之上,并与分离液形成明显的界面。
取白细胞层(0~5ml)加至含5 ml Hanks液的中试管中。(3)用毛吸滴管混匀,轻轻沿管壁加在盛有5 ml淋巴细胞分离液的离心管中,使之重叠于淋巴细胞分离液上,分层良好。(4)2000 rpm 离心20min。
惰性分离胶促凝管 金黄头盖,采血管内添加有惰性分离胶和促凝剂。标本离心后,惰性分离胶能够将血液中的液体成分(血清或血浆)和固体成分(红细胞,白细胞,血小板,纤维蛋白等)彻底分开并完全积聚在试管中央而形成屏障,标本在48小时内保持稳定。
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