大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于如何分离细胞转染成功的问题，于是小编就整理了1个相关介绍如何分离细胞转染成功的解答，让我们一起看看吧。

1. 细胞转染的操作方法?

1、细胞转染的操作方法?

细胞转染是将外源DNA、RNA、蛋白质等分子导入到目标细胞中的一种实验操作。以下是常见的细胞转染方法：化学法转染 常用试剂：例如聚合物如聚乙烯亚胺PEI、聚-L-赖氨酸PLL、聚-L-半胱氨酸PLC；阳离子表面活性剂。操作步骤：将转染试剂与目标分子（如质粒DNA、siRNA等）混合，形成载体-目标分子复合物。

．加入转染液，摇动培养瓶，使其与细胞充分接触，放入孵箱温育20－40分钟，观察细胞至皱缩变圆为止。6．吸去转染液，TBS-D洗两遍， PBS洗一遍（动作必须轻柔，避免已转染DNA的细胞脱落），加入10ml全培养基 3％CO2浓度37℃培养。

⑶将Entranster-R4000稀释液和RNA稀释液充分混合（可用振荡器振荡或用加样器吹吸10次以上）混合，室温静置15分钟。转染复合物制备完成。⑷将50μl转染复合物滴加到有0.45ml全培养基（可含10%血清和抗生素）的细胞上，前后移动培养皿，混合均匀。

转染试剂的准备① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。② 震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。 选择合适的混合比例（1：1－1：2/脂质体 体积：DNA质量）来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。

质粒DNA准备 质粒DNA浓度700ng/ul（注意：①溶解于无菌双蒸水或超纯水；②无内毒素），我用QIAGEN试剂盒除去的内毒素 操作流程 先将细胞接种到细胞培养板，细胞汇合度在70%左右，再进行转染。

到此，以上就是小编对于如何分离细胞转染成功的问题就介绍到这了，希望介绍关于如何分离细胞转染成功的1点解答对大家有用。