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1. 要从混合的T、B细胞中分离T细胞,最佳的方法是

1、要从混合的T、B细胞中分离T细胞,最佳的方法是

放射免疫分析法（B错）、ELISA（C错）、双向琼脂扩散试验（D错）、免疫电泳（E错）都是检测抗原或抗体的体外实验，不能用来分离细胞。流式细胞术（A对）是一种集光学、流体力学、电力学和计算机技术于一体，可对细胞进行多参数定量测定和综合分析的方法，可用来分离各种细胞。

单个核细胞的比重与红细胞、白细胞及血小板不同，可通过密度梯度离心进行分离。T细胞表面有CD3分子，用CD3抗体包被免疫磁珠，T细胞与之结合，B细胞不能结合。细胞经孵育再通过磁场便能分离。T细胞表面具有SRBC受体（CD2），能与SRBC结合形成花环，使形成花环的T细胞比重增大，沉降速度较快。

根据T、B细胞膜表面标志及粘附能力等特性的不同，可将两者加以分离，常用的方法有E花结形成法、免疫吸附法和免疫磁性微珠分离法，近年来应用流式细胞仪可以分离出均质性的单一细胞类型或亚群。

用毛细管伸至单个核细胞层中（位于细胞分离液与血浆的界面上），沿管壁轻轻吸出全部细胞。然后用Hanks液洗两次，每次2000r／min离心10min，最后用RPMIl640培养液将细胞配成2×106／m1的细胞悬液备用。

先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物，然后用CD4 T细胞的单抗，免疫磁珠法分离；或者利用流式细胞仪进行分选。如果精确的话得用专门仪器了，要后续培养干扰小建议磁珠分，这个操作比较简单，对设备要求不高，如果是要纯度高推荐流式细胞术了，这个需要有分选的仪器，一般分析仪器只能分析比例。

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