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原代细胞分离后不贴壁-原代细胞分离纯化

原代细胞分离后不贴壁-原代细胞分离纯化

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  1. 为什么细胞没有贴壁?Matrigel 也脱落了

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刚复苏的细胞有时所需时间长且贴壁不牢。细胞冷冻后复苏时,都有不同程度的肿胀,若以50ml培养瓶待细胞长满瓶底的70%~80%时消化冻存。特别是培养表面上的电荷密度影响较大。血清中的冷析蛋白和纤维粘连蛋白可在培养表面与细胞间架桥,有利于加快细胞贴附速率。

不容易穿过血管壁:淋巴细胞在成熟后体积较大,不容易穿过血管壁,缺乏贴壁生长的能力。单核细胞相对较小,可以通过血管壁的间隙贴附在血管壁上。定居位置在淋巴:淋巴细胞主要在淋巴器官内定居,发挥免疫功能,单核细胞在炎症和组织修复过程中起重要作用。

细胞是怎么回事,培养基没有变浑浊 培养基变浑浊的原因可能有如下几点:细胞存在污染,污染早期可以见到细胞生长;不排除传代时细胞密度过大,或者操作不当导致多数细胞不贴壁,大量细胞漂浮。细胞破碎。

准确的说是细胞不贴壁生长后就变圆了。细胞贴壁的原理是细胞能够产生粘连分子,来黏附到细胞皿的表面。而当酶处理或细胞皿表面发生变化时,粘连分子被破坏,细胞失去黏附,然后细胞由于表面张力作用就变成球形了。

复苏的细胞大部分会死掉, 因为冻藏的过程中不可避免地总会被DMSO杀死很多, 属于正常现象。如果冻藏不够迅速, 或在常温下放置了(即使很短), 冻藏液使用时没有冷却到4度等等都会增加细胞死亡。即使细胞不死, 也会受到伤害影响活性,生长。 所以也许你的细胞冻藏时不甚成功。

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