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1. 原代细胞的分离培养

1、原代细胞的分离培养

原代培养即直接从有机体取下细胞、组织或器官，让它们在体外维持与生长。

原代细胞的提取方法包括：一般悬浮细胞，如血液细胞，就分离后，直接培养。培养组织中的细胞，就需要消化过后，进行培养，也有用组织块培养的。

原代培养初期仅加一薄层培养液的目的也在于有利于细胞贴壁伸展。（7）消化时间：一般消化至肉眼尚可见微小组织颗粒即可，因为此时组织颗粒已经松散，略经吹打即成细胞团或单个细胞，过久的消化往往导致细胞损伤加重，细胞培养成活率降低。（8）其他生长因子：经过以上处理，一般原代分离细胞培养均可以成功。

消化后离心，去除上清液，加入20% BSA悬浮，再次离心，分离出中上层的神经组织和大血管，纯净的微血管段则沉淀在底部。接着用胰酶消化液进一步处理，最后通过连续梯度的 Percoll 分离出纯化的微血管段。

为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段；为传代培养创造条件；服务于临床实践，用于药物筛选等。原代细胞培养之分离注意事项 组织块培养法 1）组织块接种后的前3天，在观察和移动的过程中，注意不要引起液体的振荡。

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