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1. 细胞器分离原理

1、细胞器分离原理

细胞器的分离，一般采用差速离心法，此法是利用细胞各组分质量大小不同，在离心管不同区域沉降的原理，分离出所需组分，分离得到的细胞器，其纯度可采用电子显微镜法、免疫学法或测定标志酶活力法进行鉴定.细胞器（organelle）一般认为是散布在细胞质内具有一定形态和功能的微结构或微器官。

不同浓度的糖水分离细胞器的原理如下：不同浓度的糖水可以通过渗透作用来分离细胞器。渗透作用是溶液中溶质浓度差异引起的水分子自由扩散的现象。当细胞与不同浓度的糖水接触时，如果浓度差异存在，水分子会自发地从浓度低的一侧向浓度高的一侧扩散。这是为了达到水分子浓度均衡。

细胞器的分离主要用到的是离心技术。主要用到：（一）、差速离心（differential centrifugation）在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心，用于分离不同大小的细胞和细胞器。在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为：核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、最后为核蛋白体。

实验原理将组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差迷离心，是分离细胞器的常用方法，一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状和密度，也同离心力以及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中，同一时间内，密度和大小不同的颗粒其沉降速度不同。

将细胞分离的原理有机械法、化学法、酶消化法、酶消化法、流式细胞术。各有优点和缺点。机械法：利用物理外力，如切、割、压、挤、拉、撕、旋等方法，将细胞分离开。优点：操作简单，不使用有毒和致癌物质。缺点：对于细胞脆弱的情况，会造成细胞损伤。

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