分离到的淋巴细胞,分离到的淋巴细胞怎么处理
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1、分离的淋巴细胞放入液氮中长期保存时,冷冻过程中常用的保护剂为
【答案】:E 利用液氮深低温(-196℃)环境保存细胞,是当前世界上通用的细胞长期保存技术。其原理在于深低温环境可中断细胞的代谢,但在降温过程由于冰晶的形成和渗透压的改变均可导致细胞的损伤和部分死亡,所以在冷冻过程中一定要加用冷冻保护剂,常用的保护剂为二甲亚砜。
甘油、二甲基亚砜、脱脂牛奶或海藻酸等。常用的冷冻保护剂是二甲亚砜和甘油,使用浓度一般为甘油10%、二甲亚砜5%。不同微生物应选择不同的保护剂,保护剂的浓度应控制在不造成微生物死亡为宜。
渗透性冷冻保护剂:可以渗透到细胞内,一般是一些小分子物质,主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。非渗透性冷冻保护剂:不能渗透到细胞内,一般是些大分子物质,主要包括聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及羟乙基淀粉等。
在冻存细胞时,向培养基中加入甘油或二甲基亚砜(DMSO)这样的保护剂,能够降低溶液的冰点,防止快速冻结时冰晶的形成,从而减少对细胞的损伤。 通过采用慢速冻结和快速融化的方法,可以最大化地确保细胞的存活率。
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