原代细胞分离筛选(原代细胞分离纯化的实验结果)
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1、原代细胞分离提取方法及注意事项
原代细胞产品专家齐氏生物提醒,原代细胞培养注意事项,供参考:实验材料要新鲜,从活体分离材料后要低温保存,并尽快进行细胞分离实验。无菌操作。操作时用的培养液,可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。用酶法分离细胞时,注意酶液的浓度和控制消化时间。
原代细胞培养之分离注意事项 组织块培养法 1)组织块接种后的前3天,在观察和移动的过程中,注意不要引起液体的振荡。要避免经常翻动和振动,否则组织块不易附着于瓶壁上或附着后也会脱落飘起。2)加入的培养液不宜过多,避免浸泡的组织块受轻微的波动而脱落下来。
原代细胞的提取方法包括:一般悬浮细胞,如血液细胞,就分离后,直接培养。培养组织中的细胞,就需要消化过后,进行培养,也有用组织块培养的。
其实很简单,对于成年大鼠而言,注意下面几项即可:两部灌流法的灌流液,ph值,氧气等因素,以及灌流时间很重要 如果血细胞去的非常干净,可以不用percoll分离 3,用低速离心(50g 2 min),死细胞在上层。 台盼蓝检测后基本95%以上活性。我分离的通常在99%以上活性。
许多实验室喜欢用组织块培养法进行原代培养,因为方法简单,细胞也较容易生长。尤其是培养心肌,有时还可观察到心肌组织块搏动。细胞从组织块边缘向外长出并铺满培养皿或培养瓶后, 即可进行传代。
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