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1. 请教小鼠原代脂肪干细胞的形态及分离培养条件

1、请教小鼠原代脂肪干细胞的形态及分离培养条件

本实验采用一次消化多次收集与差速贴壁法分离小鼠腹股沟及附睾脂肪组织中的ADSC。通过倒置显微镜观察ADSC的一般形态；透射电子显微镜观察ADSC的超微结构；流式细胞术及激光共聚焦显微镜检测ADSC表面标志；利用特定的诱导液诱导ADSC分化及利用扫描电子显微镜观察ADSC与胶原支架的相容性。

取BAT cell 的Isolationbuffer 按1：1000向其中加入p/s，4°C保存。Notice：用前按1~2mg/ml比例向Isolationbuffer中加入collagenase（c5138），用滤器过滤消化液，并置于37°Cwater bath预热。

一般说来，若培养液无明显改变， 1 周换液1 次即可。待细胞长满整个培养皿内表面，即可进行传代培养。

所示的脂肪细胞，与文献中描述的脂肪细胞相一致，图中所示的脂肪干细胞与文献中描述的相一致。均形态完整，生长状态良好，适合进行共培养的后续研究。为成脂诱导阴性对照组，表明脂肪干细胞不能自发生成脂质；图为成脂阳性对照组，在成脂诱导剂作用下，脂肪干细胞能够生成脂质，经统计约有3%的脂肪干细胞发生了成脂分化。

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