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1. 急问:从人血液中分离淋巴细胞

1、急问:从人血液中分离淋巴细胞

　在短中管中加入适量淋巴细胞分离液。　取肝素抗凝静脉血与等量Hank；s液或RPMI1640充分混匀，用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，注意保持清楚的界面。水平离心2000rpm×20分钟。　离心后管内分为三层，上层为血浆和Hank；s液，下层主要为红细胞和粒细胞。

参考以下方法：1．抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中，加等量含5～10IU/ml肝素的无血清缓冲液悬浮细胞。将细胞悬液小心加在与血液等量的淋巴细胞分离液上，室温中，水平离心500×g 20分钟。

血液凝固后很难分离到淋巴细胞了，因为凝血过程造成了血细胞的破坏，血细胞在血凝块中无法分离了。

【答案】：C Ficoll分层液法是一种单次密度梯度离心法，其分离结果分布由上到下依次是：稀释的血浆层、单个核细胞层、粒细胞层、红细胞层。

采用Ficoll和泛影葡胺配制而成的淋巴细胞分离液，通过2000r/min离心后可使血细胞以不同相对密度分离开，如分离淋巴细胞可选用相对密度 077的分离液；若分离血小板可用相对密度090的分离液，若分离骨髓中的单核细胞常用相对密度120的分离液，现以淋巴细胞分离为例，方法 如下。

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