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分离细胞核的工具叫什么,分离细胞的方法及原理

分离细胞核的工具叫什么,分离细胞的方法及原理

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  1. 分离细胞质和细胞核的方法?

1、分离细胞质和细胞核的方法?

裂解:正确估算细胞体积,加入相应量的PCV,用移液器吹打细胞20-40次,剧烈震荡30s,冰浴15min,期间每5min震荡15s。 根据裂解物体积加入1/20体积的CEB-B,震荡10s,冰浴1min。 1000g 4℃ 离心5min,沉淀为核粗提物,上清是粗制的胞浆蛋白组分。

核分裂与胞质分裂是相继发生的,但属于两个分离的过程例如大多数昆虫的卵,核可进行多次分裂而无胞质分裂,某些藻类的多核细胞可长达数尺,以后胞质才分裂形成单核细胞。

先用低速使较大的颗粒沉淀,再用较高的转速,将浮在上清液中的颗粒沉淀下来,从而使各种细胞结构,如细胞核、线粒体等得以分离。由于样品中各种大小和密度不同的颗粒在离心开始时均匀分布在整个离心管中,所以每级离心得到的第一次沈淀必然不是纯的最重的颗粒,须经反复悬浮和离心加以纯化。

现在有一种提取试剂盒可以提取完整细胞核。这种试剂盒可以细胞核提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的细胞核。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的细胞核的制备。其制备物产量高,可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。

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