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分离肿瘤细胞中的巨噬细胞-分离肿瘤细胞中的巨噬细胞是

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  1. 巨噬细胞的分离方法

1、巨噬细胞的分离方法

【答案】:D 考点:巨噬细胞的分离。[解析]已知有关细胞黏附能力为:巨噬细胞或单核细胞树突状细胞B细胞T细胞=红细胞,利用单核细胞的这个特性可以将其与其他细胞分离开。

腹腔中分离取6周左右的小鼠(或600克左右的豚鼠,或3公斤左右的家兔),剃去腹部的毛并消毒。腹腔注射1ml(豚鼠20ml,家兔200ml)无菌的液体石蜡或巯基乙酸肉汤或4%淀粉肉汤。3~4天以后收集腹腔细胞。如要收集腹腔静置巨噬细胞,不注射刺激物,直接从一步开始。

人巨噬细胞可从外周血或经斑蝥激发的皮疱液中获取,也可从肺灌洗液或患者腹膜透析液中分离,但操作繁锁,得量不多。许多实验室在进行基础或配合临床研究巨噬细胞功能及其与疾病的关系、或筛检免疫增强药物和探讨其作用机制时,常选用小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,常用的检测方法如下。

单核局势细胞的分离 巨噬细胞培养具有贴壁生长的特性,将上述PBMC至于细胞培养瓶中培养,淋巴细胞悬浮于培养液中,可以祛除,贴壁生长的就是单核巨噬细胞了。改变培养条件,就可以将其从贴壁上悬浮起来,稀释成适当浓度即可。3,本方法仅提取的是外周血中的巨噬细胞,是常用的方法。

用针头轻轻挑起腹壁,使动物体微倾向一侧,使腹腔中液体集于针头下吸取入针管内,小心拔出针头,把液体注入离心管中,250g4℃离心10分钟,去上清,加10mlEagle培养基,计数细胞,每只小鼠可产生20~30×105细胞,其中90%为巨噬细胞。

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