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1. 外周血细胞分离的方法有哪些?分别如何操作

1、外周血细胞分离的方法有哪些?分别如何操作

目前常用Ficoll密度梯度离心法直接分离和纯化外周血单个核细胞。方法：　在短中管中加入适量淋巴细胞分离液。　取肝素抗凝静脉血与等量Hank；s液或RPMI1640充分混匀，用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，注意保持清楚的界面。水平离心2000rpm×20分钟。

树突状细胞的培养，目前还没有传代的细胞柱，大家一般采取的是两种办法，一种是从组织分离，主要应用的是细胞磁珠经过纯化，然后配取合适的培养基进行诱导培养。另一个就是单纯的联合诱导培养，我就是采用这个方法。

取血 2用红细胞裂解液裂解红细胞，或者用FICOLL分离含有淋巴细胞的白膜层 3吸取白膜层用CD3，CD4，CD8的抗体染色，用流式细胞仪的分选功能选出目的细胞。

【答案】：A 单个核细胞的比重与红细胞、白细胞及血小板不同，可通过密度梯度离心进行分离。T细胞表面有CD3分子，用CD3抗体包被免疫磁珠，T细胞与之结合，B细胞不能结合。细胞经孵育再通过磁场便能分离。T细胞表面具有SRBC受体（CD2），能与SRBC结合形成花环，使形成花环的T细胞比重增大，沉降速度较快。

采集方法：外周血干细胞（PBSC）的采集方法与成分血的单采术类似，即用血细胞分离机分离采集外周血的单个核细胞组分。多采用分离淋巴细胞的程序分离。一般情况下行大静脉穿刺即可，外周静脉穿刺困难（尤其是小儿） 时需中心静脉穿刺。

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