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金标血细胞分离-血液金标法

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  1. 如何将全血中的红细胞,白细胞,血小板分离?

1、如何将全血中的红细胞,白细胞,血小板分离?

利用渗透压除掉红细胞( 可用氯化铵溶液)然后离心取白细胞沉淀 或者 用Ficoll密度梯度离心(400g左右)。 白细胞在血浆与红细胞层之间。

离心法:利用离心力把血液里不同密度的成分分开。

洗涤法以5%EDTA抗凝的血样在室温下,以1500rpm/ 200g离心12分钟,离心后上层为富血小板血浆,下层为压积白细胞和红细胞。将富血小板血浆转入塑料试管,3500rpm/1200g离心5min。弃去上层血浆,用血小板洗涤液洗涤3次。

至3000转/分钟。临床经验和研究显示,分离血浆和红细胞,推荐使用的离心转速范围为2000至3000转/分钟。当离心转速低于2000转/分钟时,分离效果可能不够理想,无法得到纯净的血浆和红细胞。而当离心转速超过3000转/分钟时,可能会对血液组分造成损伤,导致红细胞破裂或其他不良反应。

中性粒细胞分离的方法 标准方法:Ficoll-泛影钠(Ficoll-Hypaque)密度梯度及红细胞裂解法 1) 取一50ml聚乙烯管,无菌采集人外周静脉血,加4ml8%或5%的柠檬酸盐液定容至40ml。上述全血300gX20min,离心,室温。

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