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血液分离出细胞过程-血细胞分离的基本原理

血液分离出细胞过程-血细胞分离的基本原理

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  1. 血液怎么分离出血浆、血清及淋巴细胞?

1、血液怎么分离出血浆、血清及淋巴细胞?

取血后,静置1-2小时,置于离心机内以3000P/m离心15分钟,用移吸管吸出分离的血清(上层乳黄色的上清液),置于4℃冰箱保存。测定时移至室温下30分钟解冻。剩下的应该是血浆了。淋巴细胞不可能从剩下的血浆分离了。从另外一份全血里,加抗凝剂,分离出淋巴细胞。

无菌抽取静脉血2ml,去掉针头注人含有肝素的无菌试管中摇匀,加入2ml Hanks溶液进行对倍稀释,混匀。 用吸管吸取稀释血液沿试管壁缓缓加到含有2ml淋巴细胞分离液的试管中(血液:Hanks液:淋巴细胞分离液的比例为1:1:1),沿管壁流下的稀释血液叠加在分离液之上,并与分离液形成明显的界面。

目前常用Ficoll密度梯度离心法直接分离和纯化外周血单个核细胞。方法: 在短中管中加入适量淋巴细胞分离液。 取肝素抗凝静脉血与等量Hank;s液或RPMI1640充分混匀,用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上,注意保持清楚的界面。水平离心2000rpm×20分钟。

全血可以直接采取人的或动物的 血液凝固后最上层的清澈淡黄色的液体为血清 血浆:离开血管的全血经抗凝处理后,通过离心沉淀,所获得的不含细胞成分的液体,即血浆。

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