胰岛贝塔细胞分离-胰腺贝塔细胞
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1、某实验小组以胰岛β细胞为对象,利用细胞培养技术,以下列的实验材料和用...
Ⅰ.胚胎干细胞培养过程中加入适当诱导物,发现培养的细胞呈胰岛样细胞的变化,下列系列实验,以检测该细胞是否具有胰岛B细胞的生理功能。(1)胰岛素释放实验:控制培养液中葡萄糖的浓度,检测细胞分泌的胰岛素的量,图甲表示所得实验结果,据此分析干细胞诱导成功,得到此结论的依据是 。
用低糖培养液培养胰岛A细胞,一段时间后过滤得到细胞和滤液。(2)实验组用含有滤液的培养液培养胰岛B细胞,对照组使用不含滤液的培养液培养胰岛B细胞,一段时间后测定培养液中胰岛素的含量。(3)如果实验组的胰岛素含量高于对照组,那么说明胰岛A细胞的分泌物能促进胰岛B细胞分泌胰岛素。
由此可见,除了INS分泌、抵抗外,还应研究β细胞的生长能力。 β细胞增长能力与Ⅰ型糖尿病的发病关系不大,它主要因自身免疫损伤胰岛,发病初期经历了INS的合成由增多到减少的变化过程,表明胰岛为满足机体对INS的需求进行了再生的努力,因不能充分代偿,必然引发糖尿病。
细胞污染的预防 ①实验用品防止污染。细胞培养所用试剂、耗材、器材的清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌要仔细,并在无菌实验检测阴性后才能使用。操作室及剩余的无菌器材要定期清洁、消毒、灭菌。②操作过程防止污染。③穿着容易起静电或吸附灰尘的衣物必须更换为白大褂后才能进入细胞间。
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