细胞中主要分离物质的方法(常用细胞分离的方法有哪些)
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1、细胞内蛋白质大分子怎么分离纯化
一)根据分子大小不同的纯化方法 透析 利用蛋白质分子不能通过半透膜,使蛋白质和其它小分子物质如无机盐、单糖等分开。 密度梯度离心。蛋白质颗粒的沉降系数不仅决定于它的大小,而且也取决于它的密度。 凝胶过滤 利用蛋白质分子大小,因为凝胶过滤所用的介质是凝胶珠,其内部是多孔的网状结构。
盐析法:盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。
蛋白质分离纯化常用方法有:沉淀,电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。
其纯化生命大分子物质的基本原理是根据各种物质的结构差异性来改变溶液的某些性质,进而导致有效成分的溶解度发生变化。
分离和提纯蛋白质的方法有盐析法、离子交换法、凝胶色谱法。盐析法:盐析法是一种常用的蛋白质分离方法,原理是向蛋白质溶液中加入高浓度的盐溶液,使蛋白质的溶解度降低,从而从溶液中析出。常用的盐析剂有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。
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