淋巴细胞分离后分层图,淋巴细胞分离的基本原理与方法
大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于淋巴细胞分离后分层图的问题,于是小编就整理了1个相关介绍淋巴细胞分离后分层图的解答,让我们一起看看吧。
1、求人外周血B、T淋巴细胞的分离方法
先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物,然后用CD4 T细胞的单抗,免疫磁珠法分离;或者利用流式细胞仪进行分选。如果精确的话得用专门仪器了,要后续培养干扰小建议磁珠分,这个操作比较简单,对设备要求不高,如果是要纯度高推荐流式细胞术了,这个需要有分选的仪器,一般分析仪器只能分析比例。
分离方法说明:取新鲜抗凝血1ml,与生理盐水1:1 混匀后,小心加于2ml细胞分离液之液面上;以400g(约1500转/分,半径15cm水平转子)离心20分钟,此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层:为血浆层。第二层:为环状乳白色淋巴细胞层。第三层:为透明分离液层。第四层:为红细胞层。
PBMC分离方法的原理是基于血液成分不同的密度,通过在双重密度梯度中离心,利用较低密度部分的小分子浮力将红细胞沉淀,从而获得纯化的单克隆T细胞。外周血单核细胞(Peripheral blood monoculear cell, PBMC), 包括淋巴细胞(T细胞,B细胞和自然杀伤(NK)细胞)和单核细胞。
方法 无菌抽取静脉血2ml,去掉针头注人含有肝素的无菌试管中摇匀,加入2ml Hanks溶液进行对倍稀释,混匀。 用吸管吸取稀释血液沿试管壁缓缓加到含有2ml淋巴细胞分离液的试管中(血液:Hanks液:淋巴细胞分离液的比例为1:1:1),沿管壁流下的稀释血液叠加在分离液之上,并与分离液形成明显的界面。
关于淋巴细胞分离后分层图和淋巴细胞分离的基本原理与方法的介绍到此就结束了,不知道你从中找到你需要的信息了吗 ?如果你还想了解更多这方面的信息,记得收藏关注本站。 淋巴细胞分离后分层图的介绍就聊到这里吧,感谢你花时间阅读本站内容,更多关于淋巴细胞分离的基本原理与方法、淋巴细胞分离后分层图的信息别忘了在本站进行查找喔。
[免责声明]本文来源于网络,不代表本站立场,如转载内容涉及版权等问题,请联系邮箱:3801085100#qq.com,#换成@即可,我们会予以删除相关文章,保证您的权利。 转载请注明出处:http://www.mxzdyx.cnhttp://www.mxzdyx.cn/xbfl/8563.html