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1. 简述主要免疫细胞分离方法和分离原理?

1、简述主要免疫细胞分离方法和分离原理?

用毛细管伸至单个核细胞层中（位于细胞分离液与血浆的界面上），沿管壁轻轻吸出全部细胞。然后用Hanks液洗两次，每次2000r／min离心10min，最后用RPMIl640培养液将细胞配成2×106／m1的细胞悬液备用。

常用于分离免疫细胞群的原则：①根据细胞的大小、沉降率、粘附和吞噬细胞的能力；②按照细胞的表面标志，包括表面的抗原和受体加以选择性分离。

⑵CD8 细胞分离：用Tris 缓冲液稀释羊抗鼠IgG（浓度为10μg/m1）包被一平皿表面，然后放置4℃过夜，没有包被上的抗体用PBS 洗净。

原理 淋巴细胞分离掖是由60%的聚蔗糖2份和34%的泛影葡胺1份混合制成。它具有分子量大、无化学活性、20℃时比重为077士0.001的特性。血液中各种细胞的比重不同，淋巴细胞与单核细胞的比重约为070，而粒细胞和红细胞的比重为092左右。

用毛细管伸至单个核细胞层中（位于细胞分离液与血浆的界面上），沿管壁轻轻吸出全部细胞。然后用Hanks 液洗两次，每次2000r/min 离心10min，最后用RPMI l640 培养液将细胞配成2106/m1 的细胞悬液备用。

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