大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于人淋巴细胞分离液与PRP的问题，于是小编就整理了5个相关介绍人淋巴细胞分离液与PRP的解答，让我们一起看看吧。

1. 人外周血淋巴细胞分离液怎么用,注意事项
2. 要做PCR的血液标本如何保存
3. 密度梯度离心法分离淋巴细胞的原理
4. Ficoll和Percoll的区别
5. 细胞生物学:如何从血液中分离b淋巴细胞?

1、人外周血淋巴细胞分离液怎么用,注意事项

　在短中管中加入适量淋巴细胞分离液。　取肝素抗凝静脉血与等量Hank；s液或RPMI1640充分混匀，用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，注意保持清楚的界面。水平离心2000rpm×20分钟。

　在15mL离心管中加入5mL淋巴细胞分离液Ficoll。　取5mL抗凝静脉血与5mL无菌PBS按照1：1充分混匀，用移液管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，动作一定要轻，注意保持清楚的界面。

用淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞（PBMC）。用预温的RPMI-1640 培养液洗涤细胞两次，每次离心400×g 10分钟，去上清液。用含5%小牛血清和1%（v/v）PHA的RPMI-1640培养液将细胞稀释至5×106/ml。

取血后，静置1-2小时，置于离心机内以3000P/m离心15分钟，用移吸管吸出分离的血清（上层乳黄色的上清液），置于4℃冰箱保存。测定时移至室温下30分钟解冻。剩下的应该是血浆了。淋巴细胞不可能从剩下的血浆分离了。

方法：在短中管中加入适量淋巴细胞分离液。取肝素抗凝静脉血与等量Hank；s液或RPMI1640充分混匀，用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，注意保持清楚的界面。水平离心2000rpm×20分钟。

2、要做PCR的血液标本如何保存

PCR样本可分2种，DNA样本和RNA样本。

设立专门冰箱，专门人员，单独保存标本。（4）标本保存期间应避免反复冻融。（5）检测完标本，应置于-70℃以下保存14天，并做好登记。

温度在零下会使红细胞破裂；血液保存液有好几种，不同的保存液保存时间不同。有些稀有血型血液会制备成冰冻红细胞，需要加入甘油，置于零下70摄氏度，可以保存一年。使用前需要制备成冰冻解冻去甘油红细胞。

最好用新鲜血液提取，不具备条件时先抗凝再冷冻保存。抗凝剂最好用肝素，因为EDTA可能会对后续的PCR有影响，会螯合PCR反应中的Mg2 ，亦可根据实验要求选择适当的抗凝剂。冷冻血液的保存：先液氮速冻，再置于- 80℃保存。

这个也要看你做的什么项目，一般血能在常温下放23天左右，在冰箱里4度下可以保存23周其成分以红细胞和血浆蛋白为主，适用于各种原因引起的大出血患者库存血保存时间越长，血液成分变化越大，即酸性增加，钾离子。

3、密度梯度离心法分离淋巴细胞的原理

密度梯度离心法分离淋巴细胞的原理是：常用来分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层液比重是077±0.001的聚蔗糖（Ficoll）-泛影葡胺（Urografin）（F／H）分层液。

密度梯度离心法原理 密度梯度离心是用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度。密度梯度离心是将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。

密度梯度离心法：用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。

外周血中单个核细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同。

4、Ficoll和Percoll的区别

percoll是一种经聚乙烯吡喀烷酮pvp处理的硅胶颗粒，对细胞无毒。利用percoll液经高速离心后形成一个连续密度梯度的原理，将密度不等的细胞分离纯化。

此外，Percoll不穿透生物膜，对细胞无毒害，因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒，还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。Ficoll常用来分离人外周血单个核细胞。

Ficoll分离法是一种单次差速密度梯度离心的分离法；Percoll分离法为连续密度梯度离心分离法。

【答案】：B 分离外周血单个核细胞常用Ficoll分层液，Percoll分层液用于纯化分离单核细胞和淋巴细胞，但操作流程长。

外周血单个核细胞的分离的分层液常用：Ficoll（由上到下为血浆，单个核细胞，粒，红）和Percoll（由上至下：死细胞，单个核细胞，淋，红，粒）。1纯淋巴细胞群的采集有：黏附贴壁法，吸附柱过滤法，磁铁吸引法。

5、细胞生物学:如何从血液中分离b淋巴细胞?

无菌抽取静脉血2ml，去掉针头注人含有肝素的无菌试管中摇匀，加入2ml Hanks溶液进行对倍稀释，混匀。

先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物，然后用CD4 T细胞的单抗，免疫磁珠法分离；或者利用流式细胞仪进行分选。

PBMC分离方法是一种生物技术，它可以将多种血液成分（如红细胞、血小板和淋巴细胞）分离出来，从而获得血液中纯的单克隆T细胞。

从PBMC中分离淋巴细胞的方法有：（1）贴壁粘附法；（2）吸附柱过滤法；（3）磁铁吸引法；（4）Percoll分离液法。

到此，以上就是小编对于人淋巴细胞分离液与PRP的问题就介绍到这了，希望介绍关于人淋巴细胞分离液与PRP的5点解答对大家有用。