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1. 密度梯度离心法分离淋巴细胞的原理

1、密度梯度离心法分离淋巴细胞的原理

密度梯度离心法分离淋巴细胞的原理是：常用来分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层液比重是077±0.001的聚蔗糖（Ficoll）-泛影葡胺（Urografin）（F／H）分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体，呈中性，犌W水性高，平均分子量为400，000，当密度为2g／ml仍未超出正常生理性渗透压，也不穿过生物膜。

外周血中单个核细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同。淋巴细胞分离液是一种密度介于075∽090之间而近似于等渗的溶液，用它做密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。

血液中各种细胞的比重不同，淋巴细胞与单核细胞的比重约为070，而粒细胞和红细胞的比重为092左右。将血液加至分离液上，通过离心，可使一定比重的细胞按相应密度梯度进行分布，从而将淋巴细胞与其它血细胞分离开。材料 淋巴细胞分离液 （比重077土0.001）。 肝素。

利用 Ficoll 作密度梯度离心时，各种血液成分将按密度梯度重新分布聚集：血浆和血小板密度较低，悬浮于分离液的上部；红细胞与粒细胞密度较大，沉于分离液的底部；PBMC 密度稍低于分离液，位于分离液界面之上，移去上层组分就可获得 PBMC。根据细胞密度的不同进行分离。

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