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1. 如何提取外周血基因组DNA?

1、如何提取外周血基因组DNA?

常用的外周血白细胞基因提取方法：试验原理： 苯酚/氯仿提取DNA是利用酚是蛋白质的变性剂，反复抽提，使蛋白质变性，SDS（十二烷基磺酸钠）将细胞膜裂解，在蛋白酶K、EDTA的存在下消化蛋白质或多肽或小肽分子，核蛋白变性降解，使DNA从核蛋白中游离出来。DNA易溶于水，不溶于有机溶剂。

酚-氯仿法提取人外周血基因组DNA的基本原理是什么？蛋白质对DNA制品的污染常常影响到以后的DNA操作过程，因此需要把蛋白质除去。一般采用苯酚/氯仿抽提的方法。苯酚、氯仿对蛋白质有极强的变性作用，而对DNA无影响。经苯酚/氯仿抽提后，蛋白质变性而被离心沉降到酚相与水相的界面，DNA则留在水相。

从外周血中提取DNA，进行核酸水平的研究是临床分子生物学重要的研究手段 ［1～3］ 。在肿瘤学研究中，可以利用外周血作对照检测肿瘤组织DNA差异，开展PCR，甲基化，基因突变等多项指标的检测。然而，传统的外周血DNA的分离方法较复杂，我们进行了一些改进，具体方法如下。

采集血液前要进行充分的消毒，避免细菌污染。采集血液时要使用无菌针头和管子，避免污染。采集血液后要尽快进行离心分离，避免白细胞降解。在提取过程中要注意避免DNA的断裂和降解，可以使用一些保护DNA的试剂盒。提取后的DNA要进行质量检测，确保其纯度和完整性。

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