骨髓淋巴细胞分离液小鼠,小鼠骨髓细胞用什么来分离
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1、如何从小鼠骨髓中分离和培养DC
首先,将PMI 1640培养液中调整细胞密度至1x10^6/ml,然后加入GM-CSF和IL-4。将细胞铺于100mm或6孔培养皿中,于37℃、5% CO2的条件下培养1-2天,收集悬浮细胞,这些细胞已具备一定的成熟度。更深层次的成熟:Son法与Lutz法 Son法在短时间内可以制备高纯度的DC,但其内吞能力相对较弱。
对于人,最常用的方法是从人外周血单个核细胞(PBMC)诱导DC 的产生。而对于小鼠,最常见的方法是从骨髓细胞诱导产生DC,即骨 髓来源的DC(Bone Marrow-Derived Dendritic Cells,BMDC) 。
具有较短的半衰期并且不断被来源于骨髓的前体取代。 cDC来源于来源于共同DC祖细胞分化而成的pre-cDC,依赖于Flt3-L。 转录组分析显示cDC具有特异性的分子标记,将其与pDC和其他髓样细胞群体区分开来,特别是 转录因子zbtb46 ,特异性表达于cDC。 cDC是真正来源于造血系统的细胞。
没有。小鼠骨髓来源内皮祖细胞取自新鲜的组织,按照标准操作流程分离培养。保证细胞纯度在90%以上,同时也需经过微生物检测,保证不含有HIV。小鼠骨髓来源树突状细胞DC4本细胞经过了检测,不含有细菌、真菌。
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