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1. 细胞培养有的聚集有的分散怎么办

1、细胞培养有的聚集有的分散怎么办

将细胞分散，使其解除接触抑制，保证其营养成分快速的转运。分散的细胞需要通过离心的方式使其聚集，帮助对其进行换液，也对其均有帮助筛选作用。由于细胞之间在体内会发生接触抑制，使其不能大规模，大量的增殖，相互之间无法进行分裂。细胞培养需要使其大规模的增殖，就需要解除之一特性。

尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。

接种时，要慢慢加样，且记得轻微旋转枪头，这样做对细胞均匀分布有一定效果。接种后最好直接放入培养箱让细胞适应培养板这个新的环境，个人认为没有必要在室温放置一段时间。

个人认为是消化程度的问题。如果胰酶处理过度，细胞就会吹不散，形成絮状。原因是胰酶作用于细胞膜蛋白，过度处理引起细胞膜破裂，破裂细胞的DNA粘连在一起。--- 最近培养PC12的时候也遇到细胞聚集的问题，我查了一些资料，有些细胞就是这样的，容易聚集成团，消化之后一定要吹匀。

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