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血细胞分离术使用-血细胞分离机临床应用

血细胞分离术使用-血细胞分离机临床应用

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  1. 如何使用血细胞分离机在外周血中提取DC细胞

1、如何使用血细胞分离机在外周血中提取DC细胞

采集方法:外周血干细胞(PBSC)的采集方法与成分血的单采术类似,即用血细胞分离机分离采集外周血的单个核细胞组分。多采用分离淋巴细胞的程序分离。一般情况下行大静脉穿刺即可,外周静脉穿刺困难(尤其是小儿) 时需中心静脉穿刺。

采集外周血干细胞:外周血中也存在干细胞,但数量相对较少,需要用一些细胞因子如粒细胞集落刺激因子(G-CSF)等药物来增加外周血中干细胞的数量。当干细胞数量足够多后,就可以通过血细胞分离术进行采集。血液通过血细胞分离机分离后,干细胞被分离出来,而其余血液回输给供体。

DC细胞流程:首先,从病人外周血中抽取50毫升,通过细胞分离机提取单个核细胞。接着,细胞在实验室中培养9天,到第10天进行回输,整个疗程通常每月进行三次回输,每次治疗前需再次抽血。 CTL细胞流程:抽取100毫升病人外周血,进行3-6小时分离培养后,当天回输,一般每周一次,进行6次治疗。

DC细胞, 1973年Steiman和Cohn首次从脾脏中分离出一类与粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞形态和功都不同的白细胞,因其细胞膜向外伸出,形成与神经细胞轴突相似的膜性树状突起,故而命名为树突状细胞。 DC细胞图(dendritic cells,DCs)。

来源有外周血、骨髓、脐带等分离出单个核细胞,加入完全培养基贴壁法2-4小时,把悬浮细胞移出,剩下贴壁的细胞加入含特定诱导因子的培养基,经过一周左右,可以培养出DC细胞;还有使用磁珠分选法把这部分细胞与淋巴细胞分开后然后经过加入特定因子培养出DC细胞。这个方法费用比较高。

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