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cas9构建载体-crispercas9载体构建原理

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  1. 如何用crisp/cas9制作转基因小鼠

1、如何用crisp/cas9制作转基因小鼠

用crisp/cas9制作转基因小鼠需要在胚胎上进行。

可以,基因工程技术可以改变动植物的基因组,从而获得人们想要的表型 比如农业育种中,通过基因改造获得抗虫害的植物,市场上常见的转基因大豆转基因玉米,都是通过基因改造的。

将蛋白与无核酸酶的 Cas9(Cas9 nuclease-null)融合,并表达适当的 gRNA,即可靶定任何 dsDNA 序列,而 RNA 可连接到gRNA 的末端,不影响 Cas9 的结合。因此,Cas9 能在任何 dsDNA 序列处带来任何融合蛋白及 RNA,这为生物体的研究和改造带来巨大潜力。

慢病毒:潜伏力与持久性的结合 慢病毒,以其长达数年的潜伏期而得名,它能感染分裂期和非分裂期细胞,拥有复杂的基因组结构。HIV-1改造的慢病毒载体,通过多质粒共转染技术,稳定地将基因插入细胞基因组,成为构建基因表达稳定细胞系和CRISP/CAS9技术的重要工具。

比如在体外细胞培养,编辑可行,但是体内实验就不行。再比如最新的crisp/cas9基因编辑技术,虽然可以实现某些基因改造,但是对基因及其两端序列又有很多特殊要求,无法实现对大多数基因的改造。总的来说,以人类目前的基因技术实力而言,或许有尝试的可能,但却风险极大,因此完全没必要冒险。

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