慢病毒包装载体构建(慢病毒载体包装时的受体细胞是)
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1、采用慢病毒载体构建shRNA载体有什么优势?
慢病毒载体所携带的目的基因可以整合入细胞基因组,稳定长期表达。
慢病毒载体可以将外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达目的序列的效果。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,从而达到良好的的基因治疗效果。
然而 shRNA 慢病毒颗粒即刻加入各种哺乳细胞,包括原代和未分化细胞。shRNA 质粒和 shRNA 慢病毒颗粒可用嘌呤酶素使其可以稳定表达 shRNA。
装载shRNA序列的真核表达载体,同时也是慢病毒包装系统中的穿梭载体,可用以包装慢病毒。缺点:(1)载体上没有荧光标记。(2)载体骨架稍微有点大,有7K左右。
siRNA 基因沉默子进入培养细胞,可快速有效地短暂地降低靶基因的表达。使用嘌呤酶素选择 shRNA 或 shRNA 慢病毒颗粒是一种达到稳定基因沉默的方法。因此,如果一个靶基因的蛋白转换较慢,shRNA 质粒或 shRNA 慢病毒颗粒应该是达到同样效果的理想选择。
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