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构建质粒载体公式怎么写,构建质粒载体的基本原则

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  1. 什么是大肠杆菌质粒载体?

1、什么是大肠杆菌质粒载体?

大肠杆菌质粒载体是应用最广泛的克隆载体,含有大肠杆菌源质粒的复制起始位点,能够在转化的大肠杆菌中按质粒复制的形式进行复制。pBR322是一种常用的典型质粒载体。

质粒载体 质粒载体,相对分子质量较小、独立于染色体DNA之外的环状DNA(一般有1~200 kb左右,kb为千碱基对),有的一个细菌中有一个,有的一个细菌中有多个。

穿梭质粒是指可以在多种宿主下复制。比如说通常能够在哺乳动物,酵母或者其他细菌复制表达的质粒,同时可以在大肠杆菌内复制。这样利于对质粒的分子生物学操作和大量制备。

大肠杆菌素是一种毒性蛋白,它可以使不带Col质粒的亲缘关系密切的细菌菌株致死。 根据质粒DNA中是否含有接合转移基因,可以分成两大类群:即接合型质粒和非接合型质粒。接合型质粒亦称自我转移的质粒,这类质粒除含有自我复制基因外,还带有一套控制细菌配对和质粒接合转移的基因,如F质粒,部分R质粒和部分Col质粒。

使分子量尽可能减少,以便于基因工程操作。缺点:质粒对宿主生存并不是必需的。噬菌体载体:插入型载体只能承受较小分子量(一般在10kb以内)的外源DNA片段的插入。粘粒载体:外源片段克隆在粘粒载体中是以大肠杆菌菌落的形式表现出来的,而不是噬菌斑。这样所得到的菌落的总和就构成了基因文库。

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